差异凝胶电泳筛选人骨肉瘤细胞多药耐药相关蛋白.pdfVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 http：／／www．biother．org · 440 · ChinJCancerBiother，Oct 2008，Vo1．15，No．5 DOI：10．3872／j．issn．1007-385X ·2008·05·008 · 论 著 · 差异凝胶电泳筛选人骨肉瘤细胞多药耐药相关蛋白 孙大辉，张德宝，谷贵山 (吉林大学 第一 医院 骨关节一科，长春 130021) [摘 要] 目的：应用差异凝胶电泳分析骨肉瘤多药耐药细胞株与亲本细胞株蛋白质表达的差别，筛查骨肉瘤细胞多药耐 药相关蛋白。方法 ：以小剂量多柔比星(doxombicin，DXR)诱导人骨肉瘤细胞株MG一63，建立骨肉瘤多药耐药细胞株MG-63／ DXR100。以差异凝胶电泳分离两组细胞中的全部蛋白质 ，应用图像扫描和 DeCyder软件分析差异 (表达增加或减少 30％) 表达的蛋白质点，对其进行质谱鉴定，并在Mascot数据库中检索。结果 ：共检测到明显差异表达的蛋白质点30个，选择其中 h a n 18个点进行质谱鉴定，有5个蛋白质点鉴定成功，它们分别是与肿瘤细胞转移相关的基质金属蛋白酶 1(matrixmetalloprotein— ases1，MMPI)、具有解毒功能的乙醇脱氢酶6(alcoholdehydrogenase6，ADH6)、属于抑癌基因的FERM域结合蛋白3(FERM ． F domaincontainingprotein3，FRMD3)，以及两个分别由128和300个氨基酸残基构成的未知蛋白。MMP1、ADH6和2种未知蛋 D 白在耐药细胞表达显著高于非耐药细胞组，而 FRMD3表达显著显著低于非耐药细胞。结论e ：通过差异凝胶电泳筛查到 ， p a MMP1、ADH6、FRMD3及2种未知蛋白质在骨肉瘤细胞的多药耐药细胞和非耐药细胞中差异表达，它们可能参与骨肉瘤细胞 _E m 的多药耐药机制。