大孔吸附树脂提取纯化甘草有效部位研究.pdfVIP

2008年6月 第10卷 第6期 中国现代中药Modem Chinese Medicine Jun．2008 Vo1．10 No．6 大孔吸附树脂提取纯化 甘草有效部位研究△ 张宇燕 ，杨洁红 ，万海同h，王玉 ，李金辉 (1．浙江中医药大学心脑血管病研究所，浙江 杭州 310053； 2．浙江中医药大学基础医学院，浙江 杭J,i1 310053) [摘要] 目的：提取纯化甘草有效部位。方法：通过大孔吸附树脂，并以甘草酸和甘草苷的提取率为指标， 优化提取纯化工艺。结果：DA201型大孔吸附树脂吸附性能优于D101型大孔吸附树脂，优化的工艺条件为上样7 倍树脂柱体积的0．6倍原液浓度的样品液，流速2．5BV·h。。，吸附时间6h；12BV的70％乙醇洗脱。结论：甘草活 性部位的得率为4．18％，其中含甘草酸78．40％，甘草苷17．51％。 [关键词] 有效部位；甘草酸；甘草苷；大孔吸附树脂；纯化 甘草为豆科植物甘草属(Glycyrrhiza)植物甘草 2 方法与结果 Glycyrrhiza uralensis Fisch．、光果甘草Glycyrrhiza gla— 2．1树脂的预处理 bra L．或胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat．的干燥根及 取新购DA201、D101型大孔树脂，分别用2BV 根茎，是一种常用的重要中药，主要成分为甘草酸 的95％乙醇浸泡24h后，充分溶胀，用新鲜的乙醇 等三萜皂苷和甘草苷为主的甘草黄酮，具有补脾益 洗脱，连续洗脱至洗出液与水(1：5)混合不出现浑 气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药的 浊，再以蒸馏水洗脱至无醇味，待用。 功能H J。甘草在临床常与附子等配伍使用。关于纯 2．2样品溶液的制备 化甘草酸的研究很多 ．3 J，但研究甘草有效部位的很 取一定量的甘草，经50~C干燥后粉碎(60目)， 少有见报道。本实验通过大孔吸附树脂，并分别以 加70％乙醇(固液I：1~1：10)，超声提取50min，过滤， 甘草酸和甘草苷的提取率为指标，优化同时提取纯 旋转蒸发真空浓缩除去乙醇，用水定容2／5g·mL一体 化三萜皂苷和甘草黄酮的方法，作为甘草药理作用 积，作为甘草样品液。 的活性部位，以便作进一步与附子等配伍的药理研 2．3含量测定方法 究，从组分和合的角度研究复方配伍增效减毒的化 2．3．1甘草酸的含量测定 精密称取甘草酸对照品 学物质基础。 8mg，加70％乙醇溶解，并定容至50mL，摇匀， 1 仪器与材料 即得160 g·mL一的甘草酸对照品溶液。精密吸取 TU一1900双光束紫外可见分光光度计(北京普析 甘草酸对照品溶液 0．2，0．4，0．6，0．8，1．0， 通用仪器有限责任公司)；USC一202超声波清洗器 1．2，1．4mL，加70％乙醇至5mL，以70％乙醇为 (上海波龙电子设备有限公司)；甘草酸对照品(E一 空白对照，在257nm处测定其吸收度。以对照品 5205，上海同田生化技术有限公司)；甘草苷对照品 浓度(Ixg·mL )为横坐标，吸收度为纵坐标，得 (111610—200604，中国药品生物制品检定所)；甘草 线性