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南 放房逮 2OO7年第6期 血纸间接血凝与斑点金标诊断血吸虫病效果对比试验 朱春霞 。王兰平 ，王孟利 (1．湖南省兽 医总站 ，湖南 长沙 410007；2．湖南省常德市兽医工作站 ，湖南 常德 415OOO) 摘 要 ：为探讨快速、准确、简便、经济的血吸虫病血清学诊断方法，减轻劳动强度，作者于2007年6月在常德市贺家 山农场对290份血样 (其中牛 190份，羊 100份)进行了血纸间接血凝诊断与斑点金标诊断效果对比试验。结 果表明：斑点金标诊 断法操作简单 ，所需检测器械较少，检测时间短 ，但成本相对较 高；间接血凝法操作较为 复杂，检测 时间较长，但成本相对较低。 关键词 ：血纸间接血凝 ；斑点金标 ；效果对 比 中图分类号 ．$854．4+3 文献标识码：B 文章编号 ：1oo6--4907(2007)06—0006-02 湖南省属于全国血吸虫病流行重疫区省份 每块反应盒可点 10份样品。 之一，每年查治家畜血吸虫病的任务较为繁重 ， (2)滴 甲液，1滴／孔 。先往点样最早的反应 目前采用的主要查病方法为粪便棉析法，少数地 盒第 1孔(1、2号)滴加 甲液 1滴 ，间隔7～5秒再 方采用血纸间接血凝诊断法初诊 ，检出阳性家畜 滴第2孔，依此类推。即保证每个点样点达到 3～ 再用粪便棉析法确诊。传统的粪便棉析法费时、 4min滴加 甲液 。 费力、检出率低且受条件限制(适宜的温度)，为 (3)滴乙液，1滴／孔。待 甲液渗入 ，每个孔滴 寻找更为快速、准确、经济的诊断方法，减轻劳动 乙液 1滴，先点先滴，依次类推。 强度 ，我们对 目前使用的血纸间接血凝和斑点金 (4)滴蒸馏水或 自来水 ，1滴 ／孔 。待第 1块 标两种血清学诊断方法进行了效果对比。 反应孔内的乙液渗入，从第 1孔滴蒸馏水 1滴 ， 1．材料与方法 依次类推，观察记录结果。 1．1材料 1．2．2血纸间接血凝 5001．LL或 IO001．LL可调微量移液器及滴头 (1)将待检血纸剪成 1×1．2cm，剪碎放人离 一 套 ，1．5mL离心管或 5～lOmL试管若干支 ，直 心管中加 2001．LL生理盐水浸泡 lOmin。 径0．55cm金属打孔器 1个 ，生理盐水，待检血 (2)用移液器从离心管中吸取 251．LL浸泡液 纸 ，家畜血吸虫病斑点金标诊断试剂(浙江省农 加入 V型板的第 1孔中即 1：10稀释，第 2孔先 科院畜牧兽医研究所提供) 加 251．LL生理盐水 ，再从离心管中吸取 251．LL浸 V型微孔有机玻璃血凝板(90。角)，251L．L、200 泡液反复混匀后弃去 251．LL稀释液 ，即 1：20稀 L定量移液器，滴管 ，离心管 ，可插针头的滴管 释 ，依次类推。 或 1-2mL注射器，待检血纸，家畜血吸虫病间接 (3)在第 1孔、第 2孔滴加血凝诊断试剂 血凝诊断试剂(上海家畜寄生虫病研究所提供)。 251L．L，第 3个生理盐水孔作对照 ，加样后摇匀并 家畜血吸虫病斑点金标诊断试剂 (每盒500 置于室温中放置 2h观察记录结果。 头份)，甲液 1瓶(13mL)、乙液 1瓶(13mL)、塑料反 1．3 结果的判 定 应盒 1袋(50块)、玻璃毛细管 1桶(5oo支)。 1．3．1斑点金标 红色斑点判为阳性(+)，粉红色 1．2检测步骤 判为可疑(±)，黄色或无色斑点判为阴性(_)。 1．2．1