北医本科课件《生物化学》第13章 RNA生物合成-ZWG.pptVIP

转录——以DNA为模板，按碱基配对原则（A-U、T-A、G-C、C-G)合成RNA链的过程。 2.σ因子脱落，并重复利用. RNA聚合酶移动沿5`→3`转录RNA链。 转录产物的“加工” 加工——使粗品RNA （没有功能）→成品（有生物功能） 方式——剪切、拼接，修饰，添加甲基（rRNA) 基因中的外显子转录 第四节 RNA的复制 某些生物（个别噬菌体、RNA病毒）由RNA携带遗传信息，进入宿主细胞后，RNA以自身为模板，由RNA复制酶催化、以4种NTP为底物，复制RNA的过程。 提问：如何实现跨越内含子转录外显子区呢？ 绕环闭合内含子区域。 （剪切、拼接针对个别没能避免内含子转录的RNA） 粗品RNA 5`加帽子 3`加尾巴 剪切(内含子对应部分)，拼接(外显子对应部分) 成熟的mRNA G or A PPP OH OH Guanylyl transferase Methyl transferase Capping methylation Phosphatase P + PP G or A 保护 mRNA 5‘ 端，加强翻译 RNA穿出细胞核，指导蛋白质合成 转录 翻译 二 tRNA前体的加工 主要方式有： 剪切： 去除多余核苷酸 剪接 ：去除初级转录本中的内含子，再连接 3’末端加-CCA结构 1 2 3 4 5 6 7 cuts at the 5 end cuts at the 3 end CCA-OH 3‘ addition：tRNA nucleotidyltransferase tRNA的加工过程 原核生物： rRNA的前体经核酸酶作用后，生成23S、 5S和16SrRNA。 真核生物： rRNA的前体经核酸酶作用后，生成 28S、5.8S和18SrRNA。 5SrRNA自成体系，在成熟过程中加工甚少。 rRNA的加工也包括碱基的修饰。 三 rRNA前体的加工 原核rRNA的加工过程 真核生物rRNA前体的加工 ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ?????? ?????? ?????? ?????? ???? ?????? ?????? 三 DNA指导的RNA聚合酶 1. 原核生物RNA聚合酶（以大肠杆菌为例） 1）结构： 全酶有五个亚基组成，为?2??’?； 全酶去除?亚基后，即为核心酶（?2??’） 。 2）功能： ?亚基：又称?因子，识别并结合启动子， 协助转录的起始。又称起始因子。 核心酶：催化合成RNA，参与RNA链的延伸。 TATAAT ? ? ? ? ?’ TTGACA -35 +1 +20 原核生物的RNA聚合酶全酶及其在转录起始区的结合 DNA双链已打开， ?因子尚未脱落 3）特点： 聚合速率慢，30－85 NTP/秒。 缺乏外切酶活性，无校对功能，错误率10-4 不同的?识别不同的启动子。 利福平与RNA聚合酶的?亚基专一性结合，可抑制结核菌的RNA合成。人的RNA聚合酶对利福平不敏感。利用此特点可研制杀菌药物。 2. 真核生物RNA聚合酶： 较原核的酶复杂，已清楚的有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。 真核生物RNA聚合酶对利福平不敏感 起始阶段 延长阶段 终止阶段 第二节 转录过程 起始阶段（以原核为例）： σ因子与核心酶组成全酶，识别起始位点并与启动子结合 → DNA局部构象改变 →解开一段DNA双链，形成转录空泡 →RNA聚合酶进入转录起始部位 →转录开始 →σ因子从复合物脱落，与新的核心酶结合，起始另一次转录 →σ因子脱落 →核心酶沿DNA链向下游移动。 转录空泡：也称为转录复合物，就是RNA的核心酶、DNA模板和转录产物RNA三者结合在一起的复合体 与DNA复制不同的是，RNA合成不需引物。 σ因子必需脱落，否则核心酶不滑动，RNA链不能延长。 ?因子可再次与核心酶结合，循环使用。 开始 1.RNA聚合酶 ?因子识别转录起点（启动子）识别部位， RNA聚合酶 核心酶结合在启动子的结合部位 (启动子) 打开螺旋（17个核苷酸），形成聚合酶-DNA-