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Procedure for identifying E. coli Salmonella and Shigella * Salmonella Shigella Agar: SS medium Selective agents (inhibit the accompanying microbial flora): Brilliant green (煌绿) Bile salts Sodium thiosulfate Citrate (Na, Fe) Sodium thiosulfate: H2S production by its reduction, a colony with black center Lactose: Degradaiton to acid showing presence of coliform bacteria (E. coli, Klebsiella, Enterobacter) Neutral red: pH indicator * Pouring the agar plate * Streak plate technique Patient’s stool sample Student’s stool sample The single colony will be used for KIA test * 双糖试验(Kligler iron agar, KIA test) 发酵乳糖, 产酸产气 发酵葡萄糖, 产酸产气 蛋白质脱氨, 产碱 产H2S 动力 * * Suspected colony Incubation at 37?C Urea Phenol red Red color Urease test Ammonia * Characteristics E. coli S. typhi PA PB Shigella Proteus Lactose degradation + - - - - - Glucose degradation + + + + + + Motility + + + + - + H2S production - +/- +/- ++++ - ++ Urease test - - - - - + KIA test and urease test: results * IMViC Test * Indole Test Para-dimethyl-aminobenzaldehye, Kovac’s reagent (对-二甲基-氨基苯甲酸,寇试剂) Tryptophan (色氨酸) in peptone Tryptophanase (色氨酸酶) Indole (吲哚) A pink-colored complex (Rose indole, a red-violet ring at the top of broth) IMViC Test * Glucose Stable acids, pH ≤ 4.4 (乙酸、乳酸) Pyruvic acid (丙酮酸) No further metabolism Methyl red A bright cherry red Acids production, pH decline Further metabolism to produce neutral end products, pH increase (乙酰甲基甲醇等) NaOH (or KOH) React with ?-naphthol Mahogany red (红褐色) Methyl red test Voges-Proskauer test IMViC Test * Citrate utilization test Citrate Alkaline bicarbonate ions, pH7.4 Bromothymol blue (溴麝香草酚蓝) Green to blue IMViC Test * E. coli Ea 蛋白胨水(蓝色盖) 葡磷胨水(绿色盖) 枸橼酸盐水 葡磷胨水(绿色盖) 蛋白胨水(蓝色盖) 葡磷胨水(绿色盖) 枸橼酸盐水 葡磷胨水(绿色盖) IMViC test: inoculation 15° * E. coli: + + - - Ea: - - + + /bioL/wellmeyer/media/IMViC.htm IMViC test: results * * /faculty/k/h/khb4/enve301/301labs/301labgraphics/streak.gif * Pyruvic acid丙酮酸 * Alkaline bicarbonate ions碳酸氢盐,碱性 溴麝香草酚
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