松果腺对大鼠脾脏T淋巴细胞增殖率季节性变化的影响.pdfVIP

天 津 中 医 药 2008年2月第25卷第1期 Tianjin Journal of Traditional Chinese Medicine Feb．2008，Vo1．25 No．1 松果臁对大鼠脾脏T淋巴细胞 增殖率季节性变化的影响 袁卫玲，马淑然，郭霞珍，李晓君，刘晓燕，顾晓静，徐巍华，赵树宏 (北京中医药大学基础医学院，北京 100029) 摘要：【目的】探讨松果腺对脾脏免疫功能季节性变化的影响作用。【方法】采用松果腺摘除动物模型，运用噻唑兰 (M1Tr)比色分析法，测定冬春两季Wistar大鼠脾脏T淋巴细胞增殖率变化情况。【结果】1)春分时生理组、假手术组和 手术组脾脏T淋巴细胞增殖率均低于冬至时相应的组别，有显著性差异，尸≮0．01。2)冬至时生理组与假手术组数值比 较有显著性差异，P0．01。春分时，手术组与假手术组比较，有显著性差异，P0．01。3)无论冬至或春分，假手术组和手 术组脾脏T淋巴细胞增殖率低于生理组。其中手术组数值明显低于当季正常对照组，差异非常显著，P0．01。【结论】 1)脾脏T淋巴细胞增殖率存在冬高春低的变化趋势。2)在春季，松果腺摘除对脾脏免疫功能具有明显的下调作用。 3)松果腺对脾脏T淋巴细胞增殖率的影响不具有惟一性。 关键词：松果腺；脾脏；T淋巴细胞增殖率；季节；免疫 中图分类号：R335 文献标识码：A 文章编号：1672—1519(2oo8)01—0048—03 松果腺目前被认为是人类和动物的重要神经 小牛血清，L一谷胺酰胺，ConA，二甲基亚砜等，均购 内分泌器官。松果腺分泌的褪黑素(Me1)调节免疫 自北京鼎国生物技术有限公司。 的功能存在季节性变化。它既可通过其他激素起间 1．3 实验方法 接调节作用，又能直接作用免疫系统而发挥作用ll】。 1．3．1 制备模型 大鼠松果腺摘除术参考相关文 本研究通过对冬至、春分时脾脏T淋巴细胞增殖率 献『21，稍作修改。 变化的观察，来探讨松果腺对脾脏免疫功能季节性 1．3．2 取材及测定 在超镜台里用75％乙醇棉球 变化影响的作用机制。 擦拭大鼠腹部，无菌状态下剖开腹部，剪取脾脏，称 l 实验材料 质量，剪一半放在培养皿里，加入不完全RPMI．1640 1．1 实验动物与分组 Wistar雄性大鼠，48只，体 培养基10mL，用研磨棒研磨，过200目不锈钢细胞 质量150～170 g。分别于2006年12月22日(冬至) 筛，吸取研后的上清于试管内 (冰浴)；加入Tris． 和2007年3月21日(春分)前40 d由北京维通利 NH C1至两倍体积，等待10 min，以使红细胞完全破 华动物研究中心购入各24只。冬至和春分组各随机 坏，然后4℃，1 000 r／min离心10 min，弃上清，拍打 分为正常对照组、假手术组和手术组(松果腺摘除模 底部沉淀；加入不完全RPMI．1640培养基10 mL，4 oC 型组)，每组各8只。饲养条件：自然光照，室温。自由 1 000 r／min离心5 min，弃上清，加入2-3 mL完全 摄取水及饲料，饲料为普通鼠全价颗粒饲料。手术 RPMI1640培养基，吹散(冰浴)；苔盼蓝染色：取 组、伪手术组分别于冬至、春分前1个月施行手术， 1O L细胞悬液加入9O L苔盼蓝，再从中取1O L 与生理组动物在相同条件下饲养到冬至、春分日晚 细胞悬液加入9O L苔盼蓝，再从中取1O L细胞 上20：00以后处死取材。 悬液加入90 L苔盼蓝，稀释1 000倍，计数细胞。 1．2 试剂及仪器 (活细胞达95％以上)。用完全RPMI．1640培养基调 l-2．1 主要仪器