红松成熟胚愈伤组织诱导外植体选择及培养条件优化.PDFVIP

第４１卷　 第３期 南京林业大学学报（自然科学版） Ｖｏｌ．４１，Ｎｏ．３ ２０１７年５月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎａｎｊｉｎｇ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ （Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｅｄｉｔｉｏｎ） Ｍａｙ，２０１７ － ＤＯＩ：１０．３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１０００ ２００６．２０１６０５０３４ 红松成熟胚愈伤组织诱导外植体选择及培养条件优化 ∗ 高　 芳，沈海龙 ，刘春苹，王　 祎，张　 鹏，杨　 玲 （东北林业大学林学院，林木遗传育种国家重点实验室，黑龙江　 哈尔滨　 １５００４０） 摘要：【目的】通过培养条件的优化和适宜外植体类型的筛选，解决红松成熟胚愈伤组织诱导中存在的愈伤组织 诱导率低、生长状态差、褐化率较高等问题，为建立红松成熟胚体胚发生体系奠定基础。 【方法】用５种培养基类 型、３种蔗糖浓度和９种植物生长调节剂组合，选择８种来源于成熟种子不同部位的外植体，对愈伤组织诱导的 培养条件和适宜外植体类型进行优化和筛选。 【结果】① 在５种培养基中，ＤＣＲ培养基上愈伤组织诱导率高于 其他培养基、生长状态好于其他培养基；② 添加在ＤＣＲ 中的３种蔗糖浓度中，３５ ｇ／ Ｌ 时的愈伤组织诱导率最高 （９２．０１％）、褐化率最低（１７．０１％）；③ ＤＣＲ添加３５ｇ／ Ｌ蔗糖情况下，９种植物生长调节剂组合中ＮＡＡ２．０ｍｇ／ Ｌ ＋ － ６ ＢＡ １．５ ｍｇ／ Ｌ组合的愈伤组织诱导率最高、褐化率最低、生长状态最佳；④ 在选出的优化培养条件下，８种来 源外植体中，从裸胚上切离的下胚轴的愈伤组织诱导率高、褐化率低，且增殖能力强，具备胚性愈伤组织的形态 ＋ ＋ ＋ － 解剖特征。 【结论】红松成熟胚愈伤组织诱导的优化培养条件为ＤＣＲ 蔗糖３５ ｇ／ Ｌ ＮＡＡ ２．０ ｍｇ／ Ｌ ６ ＢＡ １．５ ｍｇ／ Ｌ，适宜外植体裸胚上切离的下胚轴。 关键词：红松；愈伤组织；成熟胚外植体；激素组合；培养条件 － － － 中图分类号：Ｓ７２２．３；Ｓ７９１．２４７　 　 　 　 　 　 　 文献标志码：Ａ 文章编号：１０００ ２００６（２０１７）０３ ００４３ ０８ Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｆｏｒ ｃａｌｌｕｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｍａｔｕｒｅ ｅｍｂｒｙｏ ｏｆＰｉｎｕｓ ｋｏｒａｉｅｎｓｉｓ ∗ ＧＡＯ Ｆａｎｇ，ＳＨＥＮ Ｈａｉｌｏｎｇ ，ＬＩＵ Ｃｈｕｎｐｉｎｇ，ＷＡＮＧ Ｙｉ，ＺＨＡＮＧ Ｐｅｎｇ，ＹＡＮＧ Ｌｉｎｇ （Ｓｔａｔｅ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｔｒｅｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｂｒｅｅｄｉｎｇ，Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ，Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ １５００４０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：【Ｏｂｊｅｃｔ】Ｔｈｒｏｕｇｈｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓａｎｄｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｓｕｉｔａｂｌｅｅｘｐｌａｎｔ ｓｏｕｒｃｅｓ，ｏｕｒ ｇｏａｌｗａｓｔｏｒｅ⁃ ｓｏｌｖｅｔｈｅｐｒｏｂｌｅｍｓｏｆ ｌｏｗ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎｒａｔｅｓ，ｐｏｏｒ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄｈｉｇｈｂｒｏｗｎｉｎｇｒａｔｅｓｉｎｃ