胃癌幽门螺杆菌L型感染及肿瘤侵袭、转移关系的研究.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………………… 1 英文摘要………………………………………………………………………… 3 论文正文 1．前 言……………………………………………………………………… 6 2 ．材料与方法……………………………………………………………… 8 3 ．结果……………………………………………………………………… 17 4 ．讨论……………………………………………………………………… 20 5 ．结论……………………………………………………………………… 24 6 ．参考文献………………………………………………………………… 25 7 ．附图……………………………………………………………………… 27 8 ．致谢……………………………………………………………………… 37 附录 附录A 英文缩略词表………………………………………………………… 38 附录B 发表的文章……………….…………………………………………… 39 附录C 综述……………………………………………………………………. 40 1 胃癌幽门螺杆菌L 型感染与肿瘤侵袭、转移关系的研究 中文摘要 目的：研究幽门螺杆菌L 型（helicobacter pylori L-form，Hp-L 型）感染对 ： 胃癌侵袭、转移能力的影响，探讨Hp-L 型在胃癌发展中的作用和可能机制。 方法：将胃癌BGC-823 细胞与幽门螺杆菌L 型按1：20、1：100、1：500 的不同 比例共培养24 小时,进行以下实验。①应用具有聚碳酸酯和重建基底膜（基质胶， matrigel）的transwell 小室细胞侵袭模型，观察与Hp-L 型作用后胃癌BGC-823 细胞的侵袭能力；②应用免疫组化（SP 法）方法检测胃癌 BGC-823 细胞埃兹蛋 白（ezrin）、和基质金属蛋白酶2 （MMP ）的表达情况；③应用westen-blotting 2 实验测定胃癌BGC-823 细胞 ezrin 和MMP 蛋白表达量的变化；④应用革兰染色 2 及免疫组化（SP）法检测120 例胃癌组织中的Hp-L 型感染情况；⑤应用免疫组 化（SP）法检测胃癌组织中的ezrin 和MMP 的表达。比较胃癌组织Hp-L 型感染 2 阳性组和阴性组上述指标的表达结果；分析Hp-L 型感染与ezrin、MMP 表达的关 2 系以及和临床病理因素之间的关系，进一步探讨Hp-L 型感染对胃癌侵袭、转移 生物学行为的影响以及Hp-L 型在胃癌发展中的作用。 结果：①Transwell 侵袭实验发现随着胃癌BGC-823 细胞与Hp-L 型细菌的浓度 比例增大，胃癌BGC-823 细胞穿透重建基底膜的数量逐渐增多,3 次实验结果其 穿膜细胞数分别为：37±4.9、45.3±5.9、56.6±5.6 和61.3±4.5，经单因素 方差分析，穿透重建基底膜的胃癌细胞数量在不同实验组之间的差异有统计学意 义（F=24.78,P0.01）。②细胞爬片免疫组化染色可见，随胃癌细胞与细菌比例 增大，ezrin 和MMP 阳性的胃癌BGC-823 细胞数逐渐增加，在3 次实验中，每张 2 爬片的每 1000 个细胞中 ezrin 阳性的细胞数分别为：283.67±42.5、 454.5±51.7、651.5±54.4和814.5±44.3，经单因素方差分析,各组之间差异 有统计学意义(F=136.2，P0.01)。每张爬片的每1000 个细胞中MMP