玉米中伏马菌素B1高效液相色谱检测.pdfVIP

中国公共卫生2008年3月第24卷第3期 ChinJPublicHealthMar 2o08 y0f．24No．3 381 文章编号：1001．0580l2008】03．0381．02 中图分类号：R 155．5 文献标志码：B 【检验技术】 玉米中伏马菌素B 高效液相色谱检测 宫慧芝。，那磊 ，李岩溪 ，计融 ，杨军。 伏马菌素(fumonisin，FB)是近年来发现的一组镰刀菌产 物。取20 加到小试管中，加入180 1邻苯二甲醛(OPA)试 生的真菌毒素，其中FB，是污染玉米的主要成分，也是导致伏 剂，混合。在加入OPA试剂 1 min内吸取 10 1注射到 LC系 马菌素毒性作用的主要原因．广泛存在于世界范围的玉米及 统。所有的FB1峰应该是单个的。以样品提取液的峰与FB1 其制品中。对人类健康和畜牧业发展构成潜在威胁，成为真菌 标准品的峰保持时间进行比较、鉴定(出峰时间相同)。如果 毒素中继黄曲霉毒素后的又一个研究热点【1]。国际癌症研究 样品提取液的FB1峰超过FB1标准品的峰，需用甲醇再次稀 中心(IARC)把FB划分到2B组，即人类可能的致癌物{2,33。 释提取液并再次衍生。 用于分析玉米和玉米制品中的FB的方法有数种，包括薄层 1．2．4 标准曲线的制作 准确吸取浓度为 1 mg／ml的FB， 色谱法(TLC)、酶联免疫吸附分析(ELISA)、高效液相色谱法 储备液，配制成0．1，0．2，0．5，1，2，5，10，20 g／rrd浓度标准 (阳 LC)等。HPLC方法具有灵敏度高、稳定性好的特点，一 液，取20 FBl标准品工作液到小试管中，加入180 tA OPA 般定量检测玉米及玉米相关食品中的 FB多采用此种方 试剂，漩涡震荡混合。10 1进样(在加入 OPA试剂 1 min 法(43。为提高其检测的准确性，本研究利用邻苯二甲醛 内)，以FB，浓度对峰面积制作标准曲线。 (OPA)柱前衍生高效液相色谱法检测玉米产品中FB，。现报 2 结 果 告如下。 2．1 标准曲线 以FB，标准液浓度为横坐标，色谱峰面积为 1 材料与方法 纵坐标，制得标准曲线。回归方程为：Y=1．08e¨X(r= 1．1 材料 0．998，P0．05)，FBl的最低检出浓度为 0．1 g／ml。 1．1．1 仪器和试剂 液相色谱系统(包括WatersS10泵、Wa— 2．2 回收率(表1) 做1，5，10 g／ml 3个加标浓度的回收 ters420荧光检测器，美国 Waters公司)；液相色谱柱(150× 率测定实验。回收率在 71．77％～102．68％之间，平均回收 4．6mm，用5／Lm的ODS填装不锈钢cl8反相柱)；固相提取 率为84．72％，总变异系数为12．17％。 柱、真空多歧管固相萃取装置(美国Vanan公司)；普通离心 表1 3个加标浓度的回收率测定结果(％) 机(上海医用分析仪器厂)；超声波清洗器(上海超声波仪器 厂)；粉碎机(河北仪器厂)；滤膜(孑L径 0．45／Lm)；伏马菌素 B，、2一巯基乙醇、邻苯二甲醛(美国 Sigma公司)；甲醇、乙腈 (均为色谱纯，山东禹王实业有限公司)；其他试剂均为分析 纯。 1．1．2 样品 样品采自沈阳市售玉米及玉米面。 1．2 方法 1．2．1 仪器条件 流动相：甲醇一0．1 mol／L NaH2PO4(77： 23．V：V，PI-I3．3)；流速：1 ml／min；荧光检测器波长：激发波长 333 llm，发射波长425 rim；进样量：10 。 1．2．2 样品处理 研磨玉米使其 90％可以通过250～500 “ITI网筛。称取25g样品加到塑料离心管中，加入50m1甲醇 水溶液(3：1)，振荡混合 3 min。混合液离心 10 min，用 1 moVL的NaOH调pH值5．8～6．5之间，中性滤纸过滤。 2．3 准确度和精密度