猪前体脂肪细胞分化之MBD4和TDG基因作用与机制.docVIP

　　猪前体脂肪细胞分化之MBD4和TDG基因作用与机制 第一篇文献综述 第 1 章 前体脂肪细胞分化及转录调控研究 进展脂肪细胞是由胚胎发育阶段的中胚层细胞形成的前体脂肪细胞分化而来[13]，其形成是一个动态变化的过程[14]，其中伴随着细胞形态学结构和功能上的变化以及多种蛋白表达水平的参与，这些参与的转录因子是通过一系列基因表达相互作用来完成的，在这个过程中多种转录因子、信号通路和miRNA等发挥着非常重要的作用，已证实这些激素或生长因子的变化会影响前体脂肪细胞的分化[15-17]。在前体脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞的过程中，相关的转录因子与调控网络发挥着重要作用，这些基因的表达变化决定了脂肪细胞的分化过程。PPARgamma;基因作为转录因子在脂肪细胞分化时被诱导，同时在脂肪细胞分化过程中会诱导与脂滴形成和贮存相关基因的表达[18]，C/EBPalpha;基因与PPARgamma;基因协同激活与脂肪形成相关的基因，且二者表达相互促进[19]。aP2也是一个关键的脂肪生成因子，对调节脂肪形成具有重要作用[19, 20]。人们对脂肪细胞的研究已经深入到影响脂肪生成的相关基因的分子机制，有了大量基础数据的积累，但对于其分化的具体过程还不十分清楚，特别在表观遗传方面所起的作用需要进一步系统研究，因此，从分子水平研究脂肪分化可以为猪遗传育种、改善经济性状提供数据支撑。 .. 1.1前体脂肪细胞分化过程 研究者对前体脂肪细胞的发生研究较少，其形成过程和形成的调控机制还不十分清楚，而前体脂肪细胞分化过程基本清晰，前体脂肪细胞分化为脂肪细胞总体来说经历了两个阶段，第一个阶段为前体脂肪细胞的生成阶段，首先由间充质干细胞（存在于脂肪组织中）或胚胎干细胞分化为脂肪祖代细胞，脂肪祖代细胞再分化为前体脂肪细胞，在这一过程中经历了一系列的变化；第二个阶段是脂肪细胞生成的终末分化，为脂肪细胞成熟阶段，大致经历三个时期：（1）前体脂肪细胞有丝分裂克隆增殖期前体脂肪细胞呈成纤维样，一定时间后发生融合与接触，在脂肪生成激素和促进有丝分裂复合物的共同作用下进入细胞周期，经过一定时间的复制，细胞数量增多，细胞的形态发生变化，逐渐变为圆形，在这一时期，与细胞分化相关的转录因子启动，这此转录因子的启动能够加速前体脂肪细胞的分化过程。（2）终末分化阶段当细胞进入这一阶段时，脂肪细胞外基质和骨架发生一系列变化，在相关分化转录因子参与下退出细胞增殖时期，开始逐渐向成熟脂肪细胞分化，与此同时，PPARgamma; 和 C/EBPalpha; 基因表达量增高（此二者能够启动细胞分化），激活其它相关基因的表达，细胞外观形态变圆，脂滴开始出现。 .. 第 2 章 MBD4 和 TDG 基因研究进展 2.1 MBD4 基因研究进展 MBDs（methyl-CpG-binding domain）家族具有一个共有的 CpG 结合域蛋白，包括 MBDl、MBD2、MBD3、MBD4 及 MeCP2 五个成员，MBD 可以和 CpG 位点结合，募集组蛋白修饰酶，在调节 DNA 甲基化、异染色质构造、维持基因组稳定性和神经信号、基因转录激活方面起作用[136, 137]。MBD1 具有甲基化结合结构域（MBD）和转录抑制域（transcription repression domains，TRD）[138]，研究结果表明，MBD1 基因存在的 TRD 具有远距离抑制基因的作用，当缺失 TRD 的时候，MBD1 基因的转录抑制作用消失[139]。MBD 蛋白在传输表观遗传信息到下游调控蛋白时起重要作用，MBD2 对系统性红斑狼疮（Systemic LupusErythematosus，SLE）患者的 CD4+T 细胞去甲基化具有直接活化作用，而同时DNMTS 酶升高，可能要改变这种低甲基化状态，MBD2 基因表达水平升高会敲减那些SLE患者过表达的基因，过表达MBD2可能引起DNA低甲基化[140]。MBD2还与癌细胞 MT-1 启动子特殊相关，可抑制其活性[141]。MBD3 由于在 MBD 区域发生突变，不能结合到甲基化的 CpGs 位点，MBD4 是转葡糖基酶，在碱基切除修复系统（BER）中起重要作用。 .. 2.2 TDG 基因研究进展 TDG 基因是单功能尿嘧啶 DNA 糖苷酶家族成员之一，是 MUG（G：T/Umismatch-specific DNA glycosylase）的一个分支[168, 169]。在人类，TDG 基因位于染色体 12q24.1（NCBI gene ID:6996），共编码 410 个氨基酸（NCBI NM_003211）。猪 TDG 基因定位于第 5 染色体（NCBI Gene ID: 100155184），全长 17298bp，共编码 404 个氨基酸。