红汁乳菇（Lactarius hatsutake）的成功栽培一分子方法评估.pdfVIP

食用菌学报⑥2008．15(3)：85~88 文章编号 ：1005—9873(2008)03—0085—04 注 ：本文为转载论文 ，英文原文刊~ ((OperaMycologica》(2O07)1：38—41 红汁乳菇 (Lactariushatsutake)的成功栽培一分子方法评估 谭著明 ，DANELLEric，申爱荣 ，傅绍春 (湖南省林业科学院菌根性食用菌研究中心 ，长沙 410004； 。MuseumofEvolution—Botany Section，UppsalaUniversity，Norbyv．16，SE 75236，Uppsala，Sweden) 摘 要 ：自1998年始 ，我们 已在湖南、江苏等地建立 了65ha以上红汁乳菇 马尾松种植 园。这些林分一般 三年后开始产菇，年产量可达 675kg／ha。为 了确认所产红汁乳菇子实体来源于接种 的菌根苗而非 自然侵人 的孢子 ，我们进行了子实体、菌根苗菌根 的分子研究 。首次 比较 了试验地所产子实体与红汁乳菇一马尾松菌 根苗培养钵 内的菌根 的 ITS序列 。同时，用 RAPD法分析 了取 自于试验地 内的 10个红汁乳菇子实体 。结果 表明，1O个子实体中的9个与起始菌种 CX1相 比具有 75％～96％的相似性。其余一个及作为外群取 自于 340km外的广西融水的子实体与起始菌种分别具有 61％和 37％的相似性 。我们认为，上述 9个子实体与起 始菌种 的相关性 比外群和第 10个子实体更为紧密 。推测认为起始菌株及其子代菌丝形成了上述 9个子实体 ， 而其余一个子实体可能来源于周边森林侵入 的孢子 。 关键词 ：红汁乳菇 ；外生菌根 ；栽培 ；ITS序列 ；RAPD 中图分类号 ：$646．19 文献标识码 ：A 红汁乳菇 (LactariushatsutakeTanaka)是 它地方为数还很少 。这些种植 园不仅能为农村 中国和 日本等地十分珍贵 的食用菌 ，其市场在过 地区提供营养丰富、风味独特 的食 品，也能通过 去20年里稳步发展 。它具有暗红色的乳汁，与 蘑菇采收和经营 以及森林经 营为农 民提供可观 欧洲所产的松乳菇 (Lactariusdeliciosus)及血红 的收入 ，社会则可从生物多样性 的丰富和森林减 乳菇 (LactariussanguiflUUS)相似口]。许多研究 灾防灾的效益 中受惠。为 了确认收获 的子实体 者试图付诸栽培 ，但遗憾 的是 ，除了在菌种分离 是来 自于接种 的菌根苗，还是起源 于天然 的孢 和菌丝培养上取得成功之外 ，栽培 出菇方面没有 子 ，我们决定开展分子研究 。 取得实质性的结果l2~7]。 自1994年开始 ，我们通 1 材料与方法 过组织分离获得菌种 ，并接种于马尾松幼苗根系 得到菌根苗 ，并于 1998年和 1999年 ，利用这些菌 1．1供试菌株及种植园 根苗在湖南辰溪县建立 了两个种植 园，一个位于 1997年在位于湖南辰溪县王安坪镇宗碧垄 宗碧垄 ，面积为 2000m ；一个位于龙泉岩，面积 的马尾松纯林 中采集到红汁乳菇子实体 ，按照刘 达 13000m。，子 实体分别于 3年后首次发生 。 建成 的方法分离得 到纯培养菌种 ，命名为 2004年 ，龙泉岩种植 园收获 了约 900kg，相 当于 CX1。菌丝在液体培养基 [8中，22～23℃，转速 675kg／ha。2003年和 2004年 ，在 国家科技部农 150～180r／min条件下培养 5d。随后 ，菌丝球 业成果转化基金项 目支持下 ，在龙泉岩原试验地 用灭菌玻璃球振荡 30min分散破碎，并用3倍灭 附近建立 了一个面积达 36，7ha的新种植园。迄 菌水稀释。此后 ，混合培养基被添加至装有土 今 ，已陆续在湖南 、重庆 、江苏、广西等省市推广 壤 、蛭石 、珍珠岩 (按 7：2：1的比例