黄酒米曲霉菌种的培养研究.pdfVIP

及 曲的其他成分作为酒的前体物质赋予酒以独特的风 1-3-3麸皮试管培养基 味。 采用麸皮为原料，加水 55％～60％，每支装人试管的 1／ 本文以本公司技术中心保藏的米 曲霉为菌种，研究 r，] 4，121℃灭菌 30min 。 培养条件与种 曲产孢子数的关系。 1．4实验方法 1材料和方法 1．4．1米曲霉菌种的分离、纯化 采用透明圈法…挑选性能优良的菌种 ，转接人米 曲 1．1实验菌种 汁斜面试管，30℃恒温培养 4d，待孢子浓密时，置 4℃ 本公司技术 中心保藏的黄酒酿造用米 曲霉菌种 。采 冰箱中，备用。 用麸皮试管形式保藏。 1．4．2米曲霉种曲的培养及分析 麸皮过 2O目筛，筛去粉末，以免蒸煮后出现结块现 1．2实验仪器 象，造成培养时透气性不好 。按实验设计进行配料 。装人 显微镜 (JNOECXS一212～201)，上海医用光学仪器 500mL锥形瓶中。扎牛皮纸包 口于湿热灭菌锅 内 121℃ 厂；血球计数板 (XB一4—25)，上海医用光学仪器厂；超净 灭菌 3Omin。取出后趁热摇散培养基，以防结块 。自然冷 工作台(sB—JC一1A)，上海博迅实业有限公司；湿热灭菌 却至室温。 锅(YXQ—SG46—280SA)，上海佳胜实验设备有限公司；霉 取培养好的米 曲汁斜面试管 1支．无菌条件下接种 菌培养箱(MJX一250BI型)，上海博迅实业有限公司。 到500mL锥形瓶培养基中1环，充分摇匀。放入 30℃培 作者简介 ：高永强(1970一)，男，大专，酿酒师，从事绍兴酒 (黄酒)的研究工作，发表论文多篇。 2 养箱恒温培养，经 l6～20h，麸皮上略长 白色菌丝 ，根据 生长情况每隔4h左右摇瓶一次。若干次后根据生长情 况将麸皮平摊瓶的底部。再经 10h左右麸皮连接成饼 状，要求能扣则扣瓶 。轻扣轻放后继续培养。每隔 12h复 扣一次。至接种后取出进行分析。 分析方法 ：取干燥种 曲O．2g，用 100mL无菌水稀 释，充分振荡摇匀，取中间液层，用血球板记数法测其孢 子数，每瓶作两次重复。 2结果与分析 2．1菌种的分离纯化 对米曲霉菌落的透 明圈比值进行测定，结果见表 1。 表 1透 明圈法测菌落直径值 由表 1可 以看出，当菌落稀释到 10至 10-7菌落彼 ， 此分离，为单孢子菌落。挑选透 明圈比值较大的分离出的 菌落为优质纯化菌落。 将单孢子菌落转接于米曲汁斜面试管 中，3O 恒温 培养4d，待孢子浓密时取出，置于4℃冰箱中备用。 48 56 64 72 80 88 96 2．2加水量对种曲质量的影响 培养时间 (h) 水是一切生物活动的载体 ，种 曲培养过程 中米 曲霉 图2 培养时间对种曲质量的影响 需以体外吸收养分．而养分又必须先被水所溶解，在其生 由图2可知，随着培养时间的延长，米曲霉产孢子数