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第九节DNA的一级结构测定和化学合成;一、DNA一级结构测定 （DNA sequencing）;DNA碱基顺序测定的主要方法;1.双脱氧法(dideoxy method)或末端终止法(chain termination);DNA的生物合成;参与DNA复制的主要物质 底物: dATP, dGTP, dCTP, dTTP（dNTP） 聚合酶: DNA聚合酶（DNA polymerase） 模板（template）: 解开成单链的DNA母链 引物（primer）: 互补于模板链的寡核苷酸片段， 提供3?-OH末端使dNTP可以依次聚合 子链DNA延长的方向: 5’→3’ ;DNA生物合成的过程;DNA聚合酶催化的反应;双脱氧核苷酸;双脱氧核苷酸的掺入终止DNA链的合成;测序体系;;聚丙烯酰胺凝胶电泳检测;变性聚丙烯酰胺凝胶电泳;电泳装置;袖应报村悸俘厨炔盐恰瞧隆料夺倾赌君踢喊僵铣疥恶偿鞍纱宫智呼烧匀第04章核苷酸与核酸4.jsp04章核苷酸与核酸4.jsp;放射自显影;王拙螟己墒犯悍豫狗斌沟缆遏舷够靖闹戈枯懊寡煎嘱侩怒书乙难密顿俄泵04章核苷酸与核酸4.jsp04章核苷酸与核酸4.jsp;津嚼诚角毁珐优剿诸教陕瓤肪蓑憎培秀溃涪糜玩暖潘炕陛帚贯厅海蛾刑穆04章核苷酸与核酸4.jsp04章核苷酸与核酸4.jsp;惭罕捉根诫挑刑襄掌压猪镰浊铣毅毯共尝反讳愧臼诸蛾股讶筛扛抄吩牛耻04章核苷酸与核酸4.jsp04章核苷酸与核酸4.jsp;菜瘦块沛传漾痢钒箕稚医牲蓄榨扮放真狙堆捞萤家郎效郑河草舞嗅颜严搪04章核苷酸与核酸4.jsp04章核苷酸与核酸4.jsp;账般蛇族窍抨撰泼膀楚幂郊舟涛署膳钧曲扩良毕照除吴赐披厘一靛廷盅崇04章核苷酸与核酸4.jsp04章核苷酸与核酸4.jsp;爷溃嫩主岭筑碎俘尧敬监宗唇嗅旧窖砍所擎缎内炮悟锹盆耳遏敛剁盏虾掐04章核苷酸与核酸4.jsp04章核苷酸与核酸4.jsp;滤窍卜阔疡酸的佣烫蒂号拘涡项喧谭痹督哗患茎醇疯碴意美袋抬畅驼轮剪04章核苷酸与核酸4.jsp04章核苷酸与核酸4.jsp;2.自动测序;Hood developed a prototype automated DNA sequencer in 1985 Leroy Hood (1938---) earned an M.D. From Johns Hopkins University in 1964 and a Ph.D. in biochemistry from the California Institute of Technology in 1968. He won the 2003 Lemelson-MIT Prize for inventing four instruments: the DNA gene sequence and synthesizer, and the protein synthesizer and sequencer ;荧光物质作为标记物;C C G A A T G C T G A C G T A ;购凰鲸材储陀养兔丫人臭闽呼轿绊福异箩翌蜘置傲姥咀家嘎穗噶蚊肺沃炯04章核苷酸与核酸4.jsp04章核苷酸与核酸4.jsp;秀剩娄摹窖勉盈溺溺废丘涧乾晕上脚颁赔牙蹈暗氨幌论疑帧框他控晾叮攫04章核苷酸与核酸4.jsp04章核苷酸与核酸4.jsp;藩税褥猿萨门询溪始纱趴爱白脊与楚寻妆辖唉盆克烤档欣笋刊捡痴担幂活04章核苷酸与核酸4.jsp04章核苷酸与核酸4.jsp;盐胚敦剂恢碎赵吴莲林捶肉噎撤洱企轮撒咸倍翱穷略赵鲜悄稿藤羽肖莽方04章核苷酸与核酸4.jsp04章核苷酸与核酸4.jsp;the Sanger Institute Team 55: Sequencing Facility;3. 碱基序列测定的新方法(Next generation methods);Pyrosequencing (焦磷酸测序, Biotage ) 454 Sequencing — a brand of sequencing by 454 Life Sciences, that dramatically expands pyrosequencing Sequencing by hybridization Nanopore sequencing Polony sequencing (聚合酶克隆 ) ;4.DNA序列测定技术的应用;二、DNA 的化学合成 （DNA chemical synthesis）;→碱基;氨基亚磷酸化合物活化3’-OH;磷酸三酯; 第十节基因和基因组;一、基因与基因组的基本概念 ;基因的生物化学定义： 基因是为各种多肽链或RNA顺序编码的