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生物组织中可溶性还原糖的鉴定实验
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白糖
盐
味精
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还原糖的鉴定方法
1 物理学方法:观察颜色、状态、气味;直接品尝
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小苏打/NaHCO3
元明粉/Na2SO4
葡萄糖
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还原糖的鉴定方法
1 物理学方法:观察颜色、状态、气味;直接品尝
2 化学方法:
斐林试剂、班氏试剂、银氨溶液等.
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化学方法鉴定原理
生物组织中普遍存在的还原糖种类较多,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。它们的分子内都含有还原性基团(游离醛基或游离酮基)。这些还原性基团能够与试剂中的基团反应,并有明显的现象。
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还原糖(葡萄糖、果糖)+菲林试剂
还原糖与菲林试剂反应过程
水浴加热
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鉴定可溶性还原糖为什么要水浴加热?
用其它热源加热不易控制温度,很容易导致反应失败,而且斐林试剂里的蓝色氢氧化铜沉淀热稳定性较差,受热(80℃以上)很容易分解生成黑色的氧化铜沉淀和水,不能生成砖红色氧化亚铜沉淀。
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还原糖(葡萄糖、果糖)
反应过程
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2.用斐林试剂鉴定可溶性还原糖 时,溶液颜色变化过程 为
A.浅蓝色 棕色 砖红色
B.无色 浅蓝色 棕色
C.砖红色 浅蓝色 棕色
D.棕色 绿色 无色
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实验步骤
斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下,能够生成砖红色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。
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选材:含糖量较高的白色或近于白色,苹果、梨最好 。
二、实验步骤与现象
1.可溶性还原糖
制备组织样液:
制浆:去皮、切块、研磨
过滤:(用单层纱布)
取液:(2mL)
显色反应
现象:
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1、为什么要选白色或近于白色的材料进行试验?
2、为什么加入组织样液与菲林试剂后溶液或显蓝色?
答:减少试验材料对试验现象的干扰,使得试验现象明显。
答:菲林试剂中的Cu(OH)2在溶液中显蓝色。
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反应式
CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2 →
CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O
砖红色沉淀
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还原糖检测实验的实验结果
鳖桌腔谭寇拇吼胰狄哆虹竭泼磅步洋点件掂算骗赤文散尉酥甜被媒隙豁定还原糖鉴定还原糖鉴定
三种试剂现象对比
试剂
菲林试剂
班氏试剂
银氨溶液
现象
砖红色沉淀
出现银镜
砖红色沉淀
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课堂练习:
1、某些单子叶植物,如韭菜、鸢尾的叶子内含有大量的可溶性还原糖,但这些单子叶植物的叶子不宜作实验材料,原因是:
这些叶子的颜色较深,对还原性糖与斐林试剂的颜色反应起遮蔽作用
2、下列哪组试剂在使用过程中,必须加热:
A.斐林试剂鉴定可溶性还原糖的过程中 B.苏丹Ⅲ染液在鉴定动物组织中的脂肪时 C.双缩脲试剂鉴定蛋白质时 D.碘化钾溶液鉴定淀粉时 ( )
A
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3 还原糖与菲林试剂生成的产物是(
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