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紫菜多糖提取及化学成分
紫菜多糖提取及化学成分摘要:本文阐述了不同方法对紫菜多糖的提取、分离纯化技术的影响、紫菜多糖分子的结构以及化学成分发展史,并探讨了其应用价值和发展前景。
关键词:紫菜多糖;提取方法;化学成分
文章编号:1005-6629(2010)03-0052-04 中图分类号:TS255.5 文献标识码:E
紫菜是一种营养丰富的食用海藻,因具有高营养、低热量的特点而备受人们的青睐。紫菜属于红藻类(Rhodophyta), 红毛菜目(Bangiales), 红毛菜科(Bangiaceac), 紫菜属(Porphyra)。全世界约有50种左右,东南亚地区(如日本,中国大陆,台湾,韩国等)的紫菜养殖业都比较发达[1]。紫菜作为中药,具有“补肾养心,利水消肿”的功效。
近年来,人们对紫菜的提取成分及其应用价值进行了广泛的研究,发现它主要成分是紫菜多糖和蛋白质。紫菜多糖是多糖研究领域中极为重要的一个组成部分,它属于半乳聚糖硫酸酯,主要由半乳糖、3,6-内醚半乳糖和硫酸基等组成,占紫菜干质量的20 %~40 %,是紫菜的主要成分之一。自20世纪五十年代以来,研究人员对紫菜多糖的化学组分、结构以及生物活性进行了大量的研究。现介绍如下:
1紫菜多糖的提取方法
(1)紫菜多糖提取及分离纯化工艺步骤
干紫菜→粉碎→浸提→粗滤→离心→脱除蛋白→浓缩→沉淀→冷冻干燥→紫菜多糖。
(2)不同提取方式对多糖提取率的影响
①热水提取:条件设定为温度80 ℃,水与紫菜的液固重量比40∶1,提取时间120 min;②微波提取:条件设定为微波功率200 W,水与紫菜的液固重量比40∶1,微波处理时间8 min。分以下4种处理,结果见表1。
处理1(微波直接提取):样品先在微波功率200 W,水与紫菜的液固重量比40∶1,微波提取时间8 min,直接提取1次并计算提取率;处理2(微波浸泡提取):样品先在常温下浸泡2 h,用微波提取1次;处理3(微波2次浸泡提取):样品先在常温下浸泡2 h,用微波1次提取后将残碴加相同体积水再浸泡2 h,然后微波2次提取;处理4(微波冻融提取):样品先加水在-12 ℃低温冻结12 h,而后微波解冻,上述处理重复2次,而后按微波2次浸泡提取多糖。应用热水提取和不同微波提取方式对多糖提取率的影响,结果见表1。
从表1可见,微波提取优于热水提取,微波浸泡提取优于微波直接提取,2次浸泡提取, 优于1次浸泡提取, 微波冻融提取效果最高, 提取率达7.45 %。
(3)紫菜多糖的提取及纯化
去脂:称取市售干紫菜50.0 g,剪碎,用蒸馏水洗净,挤干水分,95 %乙醇浸泡去脂过夜,重复1次,纱布过滤。
除色素:滤渣以蒸馏水反复浸泡洗涤可有效去除色素。
水提:滤渣加10倍500 mL蒸馏水,文火沸水提取3小时,纱布过滤除渣。紫菜渣加蒸馏水重复提取1次,合并2次水提液。将水提液-50 ℃减压冻干,得紫菜粗多糖。
除蛋白:称取粗多糖5.6 g,蒸馏水56 mL配成水溶液,以1:1等体积加入5%三氯乙酸溶液,静置4 h,离心取上清液;取出部分上清液,加95%的乙醇至含醇量达80 %,静置过夜,沉淀物经无水乙醇洗涤后真空干燥,重复上述步骤4次,以有效去除蛋白质。-50 ℃减压浓缩,冻干得紫菜多糖(PP)。样品含量测定吸取样品液1.0 mL,按上述步骤操作测光密度以标准曲线计算多糖含量,结果含糖量达93.8 %。
2 紫菜多糖化学组分的研究历程[3]
1957年,Nunn从好望角紫菜(Porphyra capensis)中分离得到多糖,定性分析表明含有半乳糖,6-O-甲基-D-半乳糖,3,6-内醚-L-半乳糖和硫酸基。
1961年,Turvey进一步研究了紫菜多糖的结构。采用碱处理、甲基化分析等方法证明紫菜多糖的结构与琼胶类似,是由3-连接的β-D-半乳糖和4-连接的α-L-半乳糖单位交替连接而成的线性多糖。其中D-半乳糖单位部分地被6-O-甲基-D-半乳糖取代,而其中的L-半乳糖单位由L-半乳糖或3,6-内醚半乳糖构成。
1974年,Arnott, S. 1975年渡赖、峰南曾报道紫菜多糖的双螺旋体结构,由D-半乳糖和3,6-内醚半乳糖胶体排列,趋向螺旋状结合,通过羟基所形成的氢键与另一股螺旋体相联,形成稳定的微晶结构。紫菜琼胶的氢键结合形式如图1所示,紫菜多糖的硫酸酯结构如图2所示。
1981年,Vallarroel Zanlungo对智利楼斗紫菜(Porphyra columbina)的紫菜多糖的结构进行了研究。证明主要成分为2,4,6-三-O-甲基-D-半乳糖,此外尚有一定量的2,3-二-O-甲基-D-半乳糖和2,3,4,6-四-O-甲
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