禽病原性大肠杆菌E058株iucA、iucAiutA基因和sit与aerobactin操纵子基因突变株的构建和其生物学特性研究.pdfVIP

of and andcharacterization Construction E058 inavian E．coli mutants aerobactin pathogenic operon (2003AA222141)资助 研究生：凌洁璐 专业：微生物学 导师：高崧教授 刘秀梵教授 扬州大学兽医学院 2012年5月 摘 要 摘 要 研究生：凌洁璐 导 师：高崧教授 刘秀梵教授 Escherichia 禽大肠杆菌病是由禽致病性大肠杆菌(avianpathogenic coli，APEC)弓I起的 一种常见的局部或全身性感染的细菌性传染病，且易与其它病原性细菌、病毒并发或混 合感染。目前，该病己成为危害养禽业的重要细菌病，给世界范围内养禽业造成了巨大 的经济损失。 ironassimilation 病原性大肠杆菌天然形成了特定利用铁元素的摄取系统(specific 在铁含量很少的情况下，均能被强烈地诱导表达。Lafont等研究表明，气杆菌素合成的相 关基因只存在于有毒力的菌株，在无毒力菌株中并没有发现。编码气杆菌素的5个基因， 共处于一个操纵子，位于ColV这一大质粒上，其中参与气杆菌素合成的是iucA、iucB、 iucC和iucD4个基因，而iutA编码一种膜蛋白受体。本研究旨在探讨编码气杆菌素的 iucA、 特异性防治措施奠定基础。 kb大小的片段。同时将含iucA完整 失突变株，其中vir包括sit及aerobactin操纵子的15 摘 要 菌株中，运用同源重组的方法，筛选出基因突变株E058Avir。 Southern E058突变株质粒中的插 blot结果表明Zeocin、Kanamycin抗性基因在APEC 其上下游基因的表达。Aerobactin o 及E058Avir株的半数致死量(LD50)分别为104一、105一、104·8和105CFU；鸡巨噬细胞 HD一11吞噬试验结果表明突变株与亲本株的侵袭能力没有显著差异；体外竞争结果显示， 菌量是12 CFU．ml。(pO．001)，肝脏含菌量6．3x102 CFU．g‘1(p0．01)，肺脏含菌量7．8×103 CFU．g‘1(p0．001)，肾脏含菌9．4x102CFU．g‘1 (pO．001)，E058A