蛋白磷酸酶PP1ca在金鱼胚胎发育中的功能探究.pdfVIP

分类号 鱼至鱼 密级 4020074 学校代码 卫堕42 学号20081 l 蛋白磷酸酶PPca在金鱼胚胎 发育中的功能研究 OfFunctionOfProtein Analysis PPlcaIn GoldfishEmbryosDevelopment 指导教师姓名、职称 奎互猩塾撞 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二零一一年四月 LlllllllIIllllllltll II lllllllllllUl {Illlllll 911903 Y1 摘 要 蛋白质的磷酸化与去磷酸化作用是真核生物体内一种重要的调节 机制，主要参与了细胞分裂分化、新陈代谢以及细胞内的信号传导途 径的调节。而PPl作为一种重要的蛋白磷酸酶，催化了细胞内大约50％ 的蛋白质去磷酸化作用。 从结构上来说，PPl是一种包含了一个催化亚基和一个调节亚基 (通常由PPl的抑制物或者作用底物充当)的全酶，而PPl的催化亚 基包含了由不同的基因编码形成的三种不同的异构体：PPlca，PPlcp 和PPlC丫。 在本文的研究中，用金鱼胚胎作为研究材料，对其显微注射特异 性的mopholino 过程中PPIca的功能机制研究。另外，我们也用蛋白磷酸酶抑制剂奥 克代酸(OA)浸泡培养金鱼胚胎来作为研究PPl在金鱼早期胚胎发育 中作用的体外实验。 在OA浸泡胚胎的实验中，金鱼胚胎在囊胚期由于细胞凋亡而大 量死亡。这种抑制剂引发的致死性凋亡能够使大部分的胚胎发育阻断。 不过仍有一小部分胚胎能够继续存活发育，但是在这些存活的胚胎中， 多个器官的发育出现了严重的畸形，例如：抑制剂处理后的胚胎由于 分化模式改变而导致眼睛大小异常；不均等的细胞分裂分化导致胚胎 脊柱弯曲；不对称的细胞增殖和分化导致体节发育出错等等。这些异 oligomers实验中，也有类似的结果。 总的来说，本文的实验结果说明，通过显微注射特异性的 1催化亚基的表达，或者通过OA浸泡 morpholinooligomers来沉默PP 发育胚胎，都能改变各种基因的表达模式，使其产生各种异常的表型。 这也表明，PPl在胚胎的早期发育和晚期器官形成的过程中都起到了 重要的调节作用。 关键词：蛋白磷酸酶PPl，金鱼，胚胎发育，基因表达 Ⅱ ABSTRACT Protein and are phosphorylationdephosphorylationimportant mechanisms cell regulatory controling transductionin the metabolism，andsignal eukar