应用Neuro-DiI-DiO示踪周围神经再生的实验研究.pptVIP

 应用Neuro-DiI(DiO)示踪周围神经再生的实验研究 手外科科研平台 赵世伟 前列腺素E1在周围神经损伤中的临床应用研究------- 吉林市科技进步二等奖 发表相关论文 1、环化酶激活剂对大鼠感觉神经的实验研究 中华手外科杂志2006 2、环化酶激活剂对周围神经损伤大鼠脊髓背根感觉神经元的保护作用 中国临床康复2006 3、前列腺素E1促进前臂正中神经及尺神经再生电生理验证 中国临床康复2006 赵维彦 朱春雷 神经电生理检查对足趾背屈功能障碍的诊断价值---- 中华手外科杂志 2010、12 大鼠坐骨神经切断后相应脊神经节中P-S-AKT表达的变化 中华显微外科杂志/2009.4 - 大鼠坐骨神经切断后P-Erk1/2在相应背根神经节中的表达变化 中国实验诊断学/2009.3 开发对机体造成最小损伤的体外成像技术 来追踪活体动物周围神经的局部再生情况 周围神经再生检测方法的比较 周围神经形态学检测优于行为学、电生理学的检测 传统的神经形态学检测的方法，需要免疫组化染色,过程繁琐，影响因素多，不适宜活体检测。 利用示踪剂在神经内的运输进行形态学及轴浆流活动的检测具有优势 示踪剂的种类 辣根过氧化物酶 生物胞素 植物凝集素 荧光染料 葡聚糖胺 放射性核素 病毒及毒素 HRP示踪技术 顺行示踪技术 分子神经生物学方法 羰花青荧光剂的特性 高度的亲脂性 体内存留时间长 标记细胞内膜性结构 通过荧光显微镜可以检测 利用示踪剂研究周围神经再生的情况 * * 研究队伍情况 利用Neuro-Dil示踪周围神经的损伤与再生的实验研究 ----------吉林省卫生厅立项 神经干内注射Neuro-Dil示踪周围神经损伤与再生的实验研究 中国老年学杂志2008 周围神经再生研究方法的进展 中国矫形外科杂志2008 本项目研究的意义 完整的周围神经系统是由神经元、轴突、靶器官构成。 周围神经的损伤与再生从三方面来体现 神经元 轴突 靶器官 前言 神经示踪剂 利用示踪剂来研究活体周围神经再生的情况，这种示踪剂需具有以下特点： 神经特异性 随轴浆流运输 在体内不易衰减及扩散 在体外容易检测 标记过程简单，利于活体检测 血管造影剂------血管成像 神经示踪剂------神经成像 神经功能的恢复---------行为学检测（运动功能的恢复） 神经电生理的恢复------肌电图检测（神经元轴突及终板形成回路，电生理恢复） 轴突连续性的恢复------组织形态学检测（近端轴突长过吻合口） 周围神经再生的客观指标 国内外现状 组织形态学恢复 电生理恢复 行为学恢复 早于 早于 2W 4W 6M 在周围神经再生过程中 传统的神经再生形态学检测方法 HE染色、乙酰胆碱酯酶染色、免疫组化染色（抗神经丝单克隆抗体进行标记,然后呈色反应）、甲苯胺蓝染色，Fast-Blue染色等 是对再生神经轴突的静态研究 利用神经示踪剂研究周围神经的再生 研究神经再生的基础是神经轴浆流的运输。 有效轴浆运输的前提是高质量的神经通路。 目前动物实验中应用最广泛的研究神经再生的方法是利用神经示踪剂在周围神经中的转运显示轴浆流运输现象，也就是动态研究神经再生的情况。神经示踪剂通过顺行及逆行运输用来研究轴突的传导路径, 研究神经元之间的纤维联系及神经再生的情况。 放射性核素示踪 荧光素示踪 体外检测 羰花青类荧光剂 (DiI，DiO，DiA等） 固定组织 活体组织 晶体 溶液 Neuro-DiO 及Neuro-DiI是Biotium公司新研发的羰化青类衍生物，两种荧光染料具有亲脂性及亲神经性。 Neur