缓激肽通过抑制钙离子钙调神经磷酸酶信号通路缓解机械刺激引起的大鼠心肌细胞肥大.pdfVIP

t}，堡-坚皿簦堑筮鲞垫!j堡!』i盟!!鲞笙!塑￡!!i一!』生!型型．盐幽!!I!，立!：!!塑生! ·315 ．基础研究． 缓激肽通过抑制钙离子／钙调神经磷酸酶 信号通路缓解机械刺激引起的大鼠 心肌细胞肥大 裘琳 杜光 刘东 郑恒 曾和松 周宁 杨晓云 【摘要】 目的探讨缓激肽埘机械刺激引起的心肌细胞肥大的抑制作用及其可能机制 方法 体外分离培养新生大鼠，L,Jgt±$胞，行接种存特制的硅胶lllL上，分为对照组、机械刺激组(牵张硅胶m 24 mol／L的缓激肽作，L}j 牵张120％30rain)和机械刺激+缓激肽组(1×10‘8 h后再牵张120％作用 30rain)，每组3个复孔，实验至少暖复3次。以’H一亮氨酸掺入法检测各组心肌细胞蛋白合成率，心 肌细胞Or．一MHC免疫荧光染色、以激光共聚焦成像测算心肌细胞表面积提取各组心肌细胞RNA和 总蛋向后分别以实时PCR和Westernblot检测心肌细胞中心房利钠肽(ANP)、肌浆网Ca“一ATe酶 (SERCA2)mRNA表达和血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ1型受体(ATl受体)、钙凋神经磷 酸酶(CaN)的蛋白表达水平。结果机械刺激组和机械刺激+缓激肽组大鼠心肌细胞表面积均显 著大于对照组f(973±103)和(603±74)p．m二分别比(3124-29)Ixm2，P分别0．Ol和0，05]。机械刺 激组和机械刺激+缓激肽组大鼠心肌细胞蛋白合成率均显著高于对照组，分别为对照组的(4．5±3．7) 和(3．04-1．9)倍，ANP蛋r{表达水平亦均显著高于对照组，分别为对照组的(4．14-0，4)和 (2．34-0．2)倍，而SERCA2蛋白表达水平则均显著低于对照组．分别为对照组的(0．524-0．05)和 (0．794-0．08)倍(P0．01或0．05)，机械刺激组和机械刺激+缓激肽组大鼠心肌细胞ACE蛋白表 达水平均显著高于x,tfl强组，分别为对照组的(3．2±0．4)和(2．74-0．4)倍(P均0．05)，机械刺激组 与机械刺激+缓激肽组组问比较差异无统计学意义。机械刺激组和机械刺激+缓激肽组大鼠心肌细 胞ATl受体蛋白表达水平均显著高于对照组，分别为对照组的(3．7±0．3)和(2．1±0．2)倍(P分 别0．01和0．05)，且机械刺激+缓激肽组显著低于机械刺激组(P0．05)。，机械刺激组和机械刺 激+缓激肽组大鼠心肌细胞磷酸化CaN表达水平均高于对照组，分别为对照组的(6．44-0．6)和 (3．64-0．3)倍(P分别0．01和0．05)，且机械刺激+缓激肽组显著低于机械刺激组(P0．05)。、 结论缓激肽可通过抑制Ca。／CaN信号通路抑制机械刺激诱发的大鼠心肌细胞肥大= 【关键词】 心肌病，肥厚性；缓激肽；信号传导； 钙调神经磷酸酶 attenuatesmechanicalstress·induced the Bradykinin myocardialhypertrophythroughinhibiting Ca“／calcineurin pathwayQIULin。，DU He—song，ZHOU Guang。LlUDong，ZHENGHeng，ZENG Medical Ntng，YANGXiao—yun．3Departmentt圩Pharmacology，TongfiHospital，TongfiCollege，Huazhong Scienceand Universi0of Technology，Wuhan430030，China Toevaluatethe effectandrelated of m