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学习革兰氏染色法
Something attempted , Something done 有所尝试,有所成 微生物学实验 中医专业 讲解:陈晓瑜 实验室规则 1 携带物品的要求 实验一 实验内容 革兰染色法 丹麦病理学家Cristein Gram 1884发明 细菌涂片标本制作 涂片 干燥 3 固定 染色步骤 1 初染 2 媒染 3 脱色(关键) 4 复染 油镜镜检 放大倍数:1000倍 油镜的原理: 油镜头很小,透过的光线少,若光线发生折射(玻片和空气),则光线更少,物象不清。 香柏油(1.515) ≈玻璃折射率(1.52) 使用方法 1 开电源,调节亮度 2标本上加香柏油一滴,将标本放在载物台上固定 3 从旁观察并扭动粗螺旋使镜筒下降,至油镜头浸入油内接近标本时,停止 4 扭动粗螺旋使镜徐徐上升,至视野中看到标本轮廓时,扭动细螺旋至清晰 5 观察完毕后,用酒精擦洗镜头,并用擦镜纸擦干 6 将物镜转成“八”字形,关闭电源,套上保护罩,放回柜内 注意! 1观察时粗螺旋只能使镜头朝远离标本的方向运动:先使油镜完全浸入香柏油中,几乎与标本接触。 2使用完毕用擦镜纸擦去油(先用酒精湿润的镜纸,再用干镜纸),应朝一个方向擦,不要来回反复摩擦。 细菌的分布 1空气 打开培养皿,暴露在空气中30min 2手指 用手指轻轻接触培养基 3咽喉 先用棉签拭擦咽喉部粘膜 再用棉签轻轻涂抹培养基 明天看细菌培养结果 实验意义:细菌在自然界及正常人体中分布极广,且种类甚多。 本次实验应用简单方法证明空气、皮肤、咽喉均有大量细菌存在,以使大家在今后的实验和工作中树立严格的消毒及无菌观念。 * yuyu: 2 穿戴规范 3 严格的无菌观念无菌技术与操作.ppt 4 事故立即报告 5 爱护仪器,节约材料 6 实验后的清理 1 观察细菌形态(观察)细菌形态.ppt 2学习革兰氏染色法(操作) 3 观察细菌分布(操作) 重要的染色法, 同时也是鉴别细菌的方法 结晶紫 1分钟 碘液 1分钟 95%酒精 30秒 复红 1分钟 A: B: G+ G - 作业要求: 用不同颜色画出两种细菌, 并用箭头指出 37oC 培养24小时 手法要轻,勿使培养基破损 *
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