鼓槌石斛特异性PCR分子鉴定.PDFVIP

·744 · 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 6 期 2013 年 3 月 鼓槌石斛特异性 PCR 分子鉴定 * * 郑司浩，黄林芳 ，陈士林 中国医学科学院 北京协和医学院药用植物研究所，北京 100193 摘 要：目的 研究能够特异性鉴别鼓槌石斛的 PCR 引物，并优化 PCR 检测体系，确立一种快速、准确鉴别鼓槌石斛的方 法。方法 从 GenBank 数据库中下载石斛属 rDNA ITS 序列 170 余条，运用 MEGA 5.0 对所有序列进行同源性比较，找出各 变异位点，在非保守区设计 1 对特异性引物。对 35 份石斛属植物 DNA 模板进行特异性引物 PCR 扩增，显示阳性者为鼓槌 石斛。结果 将退火温度升至 58 ℃时，鼓槌石斛能被该引物特异性地扩增出来，而其他石斛属植物均为阴性，且该引物的 灵敏度可达到 0.69 ng/μL 。结论 建立一种特异性鉴别鼓槌石斛的方法，运用该特异性引物可实现从同源物种中快速、准确 地鉴定出鼓槌石斛，具有特异性好，操作简便、高效、准确等优点。 关键词：鼓槌石斛；特异性；PCR ；分子鉴定；石斛属 中图分