植物组织培养实习报告.docVIP

辽宁工程技术大学 本科生实习报告书 教学单位 辽宁工程技术大学 专 业 生物技术 班 级 2012-1班 学生姓名 徐海冬 学 号 1211040119 指导教师 李娜 为使掌握基础知识和基本技术通过理解和巩固课堂所学知识，熟悉的基本操作技术，提高动手能力及观察分析能力，科学、严谨、实事求是的。其中部分培养器皿的洗涤与环境的消毒植物组织培养的培养基配制、分装与灭菌康乃馨任务；部分植物组织培养室参观与设计。 植物组织培养室参观与设计 辽宁申博生物技术有限公司成立于2003年6月，位于阜新国家高新技术产业园区,是一家专门从事马铃薯和出口蔬菜生产、加工、销售的科技型民营企业。公司自成立以来，始终坚持以科技创新作为企业发展的推动力量，不断开发新产品，拓宽新市场，企业得到了发展迅速，现已形成了集研发、种植、生产、加工、销售于一体的产业格局。 该公司注册资金为258.8万元，经过几年的发展，现有员工156人,已形成近2800万元的资产规模，2005年实现销售收入2068万元，实现出口创汇255万元，实现利润215万元，银行信用等级为AA＋级，目前已成为阜新乃至东北地区规模最大的加工型专用马铃薯产业化生产企业。公司先后被评为“阜新市农业产业化重点龙头企业”、“阜新市农业标准化示范基地”、“辽宁省十大农机示范基地”、“优质农产品基地”和“农业标准化示范基地”。 作为阜新市转型之初成立的一家农业产业化企业，该公司自成立之日起就承担起了促进阜新经济转型的重要社会责任，本着“公司+基地+农户”的发展模式，以公司与农户的利益共享为目标，适应阜新经济转型的需要，不仅在安排下岗职工再就业方面充分发挥了作用，而且在提升阜新农业生产总体科技水平，特别是加工型专用马铃薯育种和产业化生产方面也发挥了重要的引领和带动作用。 老师集中介绍组织培养实验室守则及有关注意事项讲解本次的目的、仪器设备和器皿用具的名称。逐一讲解组培实验室的构建情况，包括准备室、缓冲室、无菌操作室、培养室、驯化室、温室等使用的各种仪器设备和器皿用具的名称用途。培养器皿的洗涤与环境的消毒 2.2玻璃器皿、用具及环境的灭菌 将洗干净晾干后的培养皿、三角瓶、吸管等玻璃用具和解剖针、解剖刀、镊子等金属器具，用纸包好，放进电热烘干箱，当温度升至100℃时，启动箱内鼓风机，使电热箱内的温度均匀。当温度升至150℃时，定时控制40min（或120℃定时120min）,达到灭菌目的。 用于无菌操作的镊子、解剖刀等用具除高压蒸汽灭菌外，在接种过程中还常常采用灼烧灭菌，将镊子、解剖刀等从浸入95%酒精中取出，置于酒精灯火焰上灼烧，借助酒精瞬间燃烧产生高热来达到杀菌等目的。操作过程中要反复浸泡、灼烧、放凉、使用，操作完毕后，用具应擦拭干净后再放置。 2.3环境的消毒 每次使用前，将配好的20%新洁尔灭溶液倒入喷雾器中，对接种室地面、墙壁、角落均匀地喷雾。在喷房顶时间，注意不要让药液滴入眼睛。然后开启紫外灯开关，照射15～ 配制母液时要用双重蒸馏水等纯度较高的水，药品应采用化学纯或分析纯级，药品的称量及定容都要准确，各种药品先以少量蒸馏水使其充分溶解，然后按培养基上的排列顺序混合。包括大量元素母液（浓缩10倍）、微量元素母液（浓缩100倍）、铁盐母液（浓缩200倍）、有机物母液（浓缩100倍）、生长调节物质（激素）母液（浓度1mg/ml）。 4植物组织培养的培养基配制、分装与灭菌 植物材料培养要获得成功，并正常生长，培养基的组成成分是一个决定性因素，不同植物要求不同的培养基，因此，在进行大量工作之前，对不同培养基应进行分析、比较、试验，选择一个符合实验材料需要的适宜培养基。大多数植物组织培养所用的培养基由无机营养物质、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成。 配置过程中要先量取所配培养基总体积的2/3体积的蒸馏水，如要配l升培养基，先量取约700 ml体积的水。再根据培养基配方，用量筒量取所需要的各种元素的母液。吸取母液时，注意应先将几种母液按顺序排好，不要弄错以免使培养基中药品成分发生改变。加入一种母液后应先搅拌均匀，避免因不均而使局部浓度过高而引起沉淀，琼脂可在加入蔗糖调节完pH值后再加入，此时应注意搅拌，以免琼脂或蔗糖沉淀于烧杯底而炭化。肥皂洗净