响应面法优化微波提取宽叶独行菜多糖工艺研究.docVIP

　　响应面法优化微波提取宽叶独行菜多糖工艺研究 徐传远，王丽萍，王 涛 （河北联合大学生命科学学院，河北 唐山 ０６３０００） 摘要：为优化宽叶独行菜（Ｌｅｐｉｄｉｕｍ ｌａｔｉｆｏｌｉｕｍ Ｌ．）多糖的提取工艺，在单因素试验的基础上，选取粒度、液料比、微波功率和微波时间作为优化因素，根据Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ试验设计原理，进行4因素3水平试验。利用响应面分析方法，建立了宽叶独行菜多糖提取得率的多元二次回归方程，并得到最佳提取工艺条件。试验结果表明，粒度、液料比和微波时间对宽叶独行菜多糖提取得率的影响均为极显著，微波功率表现为显著。当工艺条件为粒度１２０目、液料比３５∶１ ｍＬ／ｇ、微波功率４００ Ｗ、微波时间１５０ ｓ时，宽叶独行菜多糖的理论最高提取得率为０．４３４％，验证值为０．４２９％。 .. 关键词：宽叶独行菜（Ｌｅｐｉｄｉｕｍ ｌａｔｉｆｏｌｉｕｍ Ｌ．）；微波辅助；多糖；响应面法 中图分类号：Ｒ２８４．２；Ｓ５６７．２３＋９；ＴＳ２０２．３文献标识码：A：0439－８114（２０15）05－1176-05 DOI：10.14088/j.ki.issn0439-8114.2015.05.038 收稿日期：２０１４－１２－１６ 基金项目：国家自然科学基金项目；河北省自然科学基金项目（Ｃ２０１２２０９０１３） 简介：徐传远（１９７８－），男，山东长清人，副教授，博士，主要从事油菜分子细胞遗传研究，（）０３１５－３７２６５２７（电子信箱） ｃｈｕａｎｙｕａｎｘｕ＠ａｌｉｙｕｎ．ｃｏｍ。 宽叶独行菜（Ｌｅｐｉｄｉｕｍ ｌａｔｉｆｏｌｉｕｍ Ｌ．）为十字花科独行菜属多年生草本植物，又名羊辣辣或大辣辣，植株高３０～１５０ ｃｍ，广泛分布于我国北方的滨海及内陆的盐碱土上。宽叶独行菜抗逆性强，生长旺盛，常在滨海和内陆的盐碱土上形成大面积的单纯群落。其干燥全草可入药，主治肠胃炎、菌痢等疾病，是传统中草药葶苈子的药源之一［１，２］。宽叶独行菜的蛋白质含量较高，可作为青饲料饲喂猪、羊等家畜［２］。也有部分地区将其作为野菜食用［３］。其种子中含有丰富的棕榈酸，含量占总油分的５０％以上［４］。宽叶独行菜与油菜同属十字花科，通过远缘杂交，可以将其高棕榈酸特性转入油菜。同时，该种所具有的抗盐碱特性也为油菜的抗逆育种提供了宝贵的遗传资源，所以宽叶独行菜是一种极具开发前景的资源植物。 植物多糖具有多种生物活性，如提高免疫力、抗肿瘤、调节血糖等，从而在肿瘤和糖尿病的治疗中有很好的应用价值［５－７］。作为一种优良的食品添加剂，多糖可以有效改善食品的外观以及加工和食用品质，同时还有良好的保健功效，在食品中被广泛应用［８－１０］。本研究在单因素试验基础上，采用响应面分析法对宽叶独行菜多糖的微波辅助提取工艺进行优化，以期为宽叶独行菜的进一步加工利用提供参考。 １ 材料与方法 １．１ 材料与试剂 宽叶独行菜，采自唐山地区。 葡萄糖、苯酚、硫酸、９５％乙醇、氯仿和正丁醇均为分析纯试剂，购于天津大茂化学试剂厂。 １．２ 仪器与设备 ＷＧ７００ＳＬ２３－Ｋ６微波炉，佛山市格兰仕电器有限公司；ＦＣＣ－２０００恒温水浴锅，上海比朗仪器有限公司；ＤＮＰ－９０２电热鼓风干燥箱，上海精宏仪器设备有限公司；７２２Ｓ可见分光光度计，上海佑科仪器仪表有限公司；ＦＡ１２０４Ｂ电子天平，上海精科天美科学仪器有限公司；不锈钢分选筛，浙江上虞市华丰五金仪器有限公司；ＴＤＬ－８０－２Ｂ台式离心机，上海安亭科学仪器厂；ＲＥ－５２ＡＡ旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂。 １．３ 试验方法 １．３．１ 宽叶独行菜多糖的提取工艺 宽叶独行菜洗净→６０ ℃烘干→粉碎、过筛→微波处理→Ｓｅｖａｇ法去蛋白→醇沉→定容→测定。 １．３．２ 多糖提取得率的测定 采用葡萄糖为标准品，以硫酸－苯酚法测定多糖含量。 式中：吸光度测定浓度为多糖质量浓度（ｍｇ／ｍＬ）；样品稀释倍数为１；样品溶液体积为１００ ｍＬ；试验样品质量为１．０ ｇ。 １．３．３ 试验设计 试验选取４个对多糖提取得率起主要作用的因素，即粒度、液料比、微波功率和微波时间，首先进行了单因素试验。在单因素试验的基础上，采用Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ试验设计方案，并利用响应面分析方法对微波辅助提取宽叶独行菜多糖的工艺条件进行了优化。 ２ 结果与分析 ２．１ 单因素试验 ２．１．１ 粒度对多糖提取得率的影响 微波功率４００ Ｗ，粒度４０、 ６０、 ８０、 １００、 １２０目，液料比３０∶１ （ｍＬ／ｇ），后同，微波时间６０ ｓ，考察材料粒度对多糖提取得率的影响，结果如图１所示。 由图１可知，粒度为１００目时，具有最高的多糖提取得率。目数过小时，材料颗粒较大，细胞不易破碎，从而多糖不易溶出。而目数过大，材料具有较强