HPLC法测定生脉注射液中人参皂苷Rg1及人参皂苷Re含量不确定度研究.docVIP

HPLC法测定生脉注射液中人参皂苷Rg1及人参皂苷Re含量不确定度研究【摘要】本文通过建立数学模型和对不确定度的来源进行分析，对HPLC法测定生脉注射液中人参皂苷Rg1?和人参皂苷Re含量测定结果的不确定度分步评定，再合成标准不确定度，最后用扩展不确定度（置信概率为95％）来对实验结果的不确定度进行表述。 【关键词】不确定度的合成;标准不确定度;扩展不确定度 【中图分类号】R284.1【文献标识码】A【文章编号】1005-1074(2009)03-0005-02 1测量方法概述 1.1测量对象HPLC法测定生脉注射液中人参皂苷Rg1?和人参皂苷Re含量的不确定度分析。 1.2应用标准国家食品药品监督管理局标准YB 1.3实验方法精密量取供试品10ml，浓缩至近干，用流动相稀释至2ml。取五氧化二磷干燥至恒重的人参皂苷Rg1?和人参皂苷Re，人参皂苷Rg1?约10mg，精密称定，用流动相溶解并定容至15ml；人参皂苷Re约10mg，精密称定，用流动相溶解并定容至20ml；分别量取上述两种溶液各10ml，定容至20ml。分别进样20μ1，记录色谱图，按外标法计算。 1.4主要仪器和试剂Waters高效液相色谱仪（HPLC060302D）；电子天平（Sortorius BS21S，DZTP 17）：精度0.01mg；10ml量瓶（A级）、15ml量瓶（A级）、20ml量瓶（A级）；10ml移液管（A级）。2ml量瓶（A级）。对照品由中检所提供:人参皂苷Rg1?（批号110703－200424，含量测定用），人参皂苷Re（批号110754－200320，含量测定用）水为去离子水，其他试剂均为分析纯。 1.5环境条件室内温度：20℃±3℃，每小时波动≤2℃；室内相对湿度：42％±5％；供电电源：220±20V，50Hz；因此，由环境变化引起的不确定度可以忽略不计。 1.6引用文件及参考文献①中国实验室国家认可委员会.化学分析中不确定度的评估指南.北京：中国计量出版社；②国家技术监督局.中华人民共和国国家计量检定规程、常用玻璃量器.中国标准出版社；③国家质量技术监督局.测量不确定度评定与表示.北京:中国计量出版社。 2不确定度评估 2.1数学模型 式中X:注射液中的人参皂苷Rg1?或人参皂苷Re含量 A?s:样品中人参皂苷Rg1?或人参皂苷Re色谱峰的峰面积 V?s:供试品取样量(ml) V??s1?:样品定容体积(ml)?f-:高效液相色谱法校正因子，f-＝1n∑ni=1CA?i 其中C＝mV??R1?×V??R2?V??R3? m:对照品的称样量 （mg） V??R1?: 对照品初次定容体积（ml） V??R2?:稀释时移液管取样体积（ml） V??R3?:对照品最后定容体积（ml） A?i:对照品液中人参皂苷Rg1?或人参皂苷Re色谱峰的峰面积 2.2不确定度的来源分析①测量的重复性（对照品包含在校正因子里，可用变异系数表示，供试品部分包含在平行样品的计算结果中，同样可用变异系数表示）；②取样；体积（稀释转移和定容引入）。 2.3各分量的标准不确定度 2.3.1校正因子f-的标准不确定度u(f-)的评定输入量f-的标准不确定度来源于称样误差，稀释定容体积的误差，色谱峰测量的不确定性等，这些误差引起的不确定度分述如下： ①对照品（人参皂苷Rg1?或人参皂苷Re）浓度的不确定度：见表1和表2。质量部分的不确定度由称样引入，U(m)由天平引入，天平的精度U=0.01mg，取包含因子k＝3（置信度99％），对照品称量约为10mg，称样的相对不确定度分别是：U(m)＝0.01/(10k)= 3.33×10??-4?； 对照品液由对照品稀释而成，移液管和量瓶引入的不确定度应计算在内，根据国家计量检定规程规定，A级15ml的量瓶允许误差±0.02ml，A级20ml的量瓶允许误差±0.02ml，A级10 ml移液管允许误差±0.02ml，按矩形分布，取包含因子k＝3，对照品稀释定容的相对不确定度：?人参皂苷Rg1?：U(V??R1?) =(0.0215×3)?2+(0.0210×3)?2+(0.0220×3)?2＝1.50×10??－3? 人参皂苷Re：U(V??R2?) ＝ (0.0220×3)?2+(0.0210×3)?2+(0.0220×3)?2＝1.41×10??－3?。 对照品（人参皂苷Rg1?或人参皂苷Re）浓度的相对不确定度: u(C)=U?2(m)+U?2(V??R1?)(或U?2(V??R2?)) 人参皂苷Rg1?：u??