健胃消食浸膏粉对小鼠抗疲劳作用实验探究.docVIP

健胃消食浸膏粉对小鼠抗疲劳作用实验探究【摘要】 目的:研究健胃消食浸膏粉对小鼠的抗疲劳作用。方法:选用18-22g雄性ICR小鼠160只,试验设一个阴性对照组和剂量分别为0.53g/kg.bw,1.6g/kg.bw和4.8g/kg.bw的三个干预组,经口服健胃消食浸膏粉45天后,通过负重游泳时间、肝糖原含量及游泳后血清尿素和血乳酸水平观察小鼠的抗疲劳能力。结果:与对照组相比,健胃消食浸膏粉4.8g/kg.bw剂量组能明显延长小鼠负重游泳的时间,降低游泳后血清尿素和血乳酸的水平,并有升高小鼠肝糖原含量的趋势。结论:健胃消食浸膏粉具有缓解小鼠体力疲劳的作用。 【关键词】 健胃消食浸膏粉;抗疲劳;小鼠 【中图分类号】 R914【文献标识码】 B【文章编号】 1007-8517(2009)24-0008-01 健胃消食浸膏粉是以太子参、山药、山楂、陈皮和炒麦芽为原料组成的,立足益气健脾和消食化积,具有调节脾胃的功能。中医认为运动过程中肌肉运动消耗的物质有赖于脾胃生化产生营卫之气不断地来补充,长时间大强度运动后,会伴有不同程度的免疫功能低下,补脾益气对此有明显保护作用[1]。本实验便是研究健胃消食浸膏粉在运动性疲劳方面的作用,探讨这一传统中药复方的新功能,为研发提高运动耐力的中药功能品提供试验依据。 1 材料与方法 1.1 样品 健胃消食浸膏粉成分为太子参、山药、山楂、陈皮和炒麦芽,呈棕褐色粉末状。由江中药业股份有限公司提供。 1.2 仪器与试剂 游泳箱(大小约50cm* 50cm*40cm),电子天平、铅皮、秒表、全自动血生化检测仪、721分光光度计、离心机、匀浆器、沸水浴、手术器械、吸量管、试管。5%三氯醋酸(TCA)、葡萄糖标准液、浓硫酸、蒽酮试剂、4%硫酸铜、1%NaF、蛋白沉淀剂、1.5%对羟基联苯溶液、乳酸标准储备液、乳酸标准应用液。 1.3 实验动物和剂量设计 健康成年ICR雄性小鼠,共160只,6~8周龄,18~22g,由北京大学医学部实验动物中心提供(动物合格证号:SCXK(京)-2006-0008),清洁级动物房饲养,饲养环境温度21~23℃,湿度50%~60%。160只小鼠分四批,每批40只,分别进行负重游泳、血清尿素含量的测定、血乳酸含量的测定和肝糖原含量测定4个试验。每批40只动物随机分为4组,每组10只,一个阴性对照组和和剂量分别为0.53g/kg.bw,1.6g/kg.bw和4.8g/kg.bw的三个干预组,对照组喂饲普通饲料,干预组喂饲添加了相应剂量的健胃消食浸膏粉的饲料,干预45天后,进行各项抗疲劳功能试验。 1.4 实验方法 1.4.1 负重游泳实验 干预45天后,于尾根部负荷5%体重铅皮的小鼠置于游泳箱中游泳。水深不少于30cm,水温25℃(1.0℃,记录小鼠自游泳开始至死亡的时间,即小鼠负重游泳时间。 1.4.2 血清尿素含量的测定 干预45天后,在温度为30℃的水中不负重游泳90min,休息60min后采血分离血清,用全自动生化分析仪测定血清尿素氮(BUN)。 1.4.3 血乳酸含量的测定 干预45天后,采尾血20(l,然后小鼠不负重在温度为30℃的水中游泳10min,于游泳后0min和20min各分别采血20(l,将三次采得的血样分别加入0.48mL 1% NaF溶液中充分混匀至透明,然后加入1.5mL蛋白沉淀剂,振荡混匀,于3000转/min离心10min,取上清液测定乳酸含量。 1.4.4 肝糖原测定 干预45天后,处死动物。取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干,精确称取肝脏100mg,加入4mL TCA,每管匀浆1min,将匀浆液倒入离心管,以3000转/min离心15min,将上清液转移至另一试管内。取1mL上清液放入10mL离心管中,每管加入95%的乙醇4mL,充分混匀至两种液体间不留有界面。用封口膜将离心管口封住,室温下竖立放置过夜。沉淀完全后,将试管于3000转/min离心15min,小心倒掉上清液并使试管倒立放置10min。然后用2mL蒸馏水溶解糖原,用蒽酮法测定肝糖原含量。 1.5 统计方法 所有结果以均数(标准差表示,采用SPSS13.0软件进行单因素方差分析,比较各实验组与对照组的差异。 2 结果 2.1 健胃消食浸膏粉对小鼠负重游泳时间、血清尿素和肝糖原含量的影响 小鼠经口服不同剂量的健胃消食浸膏粉45天后,4.8g/kg.bw剂量组小鼠负重游泳时间明显长于对照组,且差异有显著性(p0.05),见表 1。 后,4.8g/kg.bw剂量组小鼠游泳后即刻血乳酸值低于对照组,且差异有显著性(p 1