凋亡抑制基因存活素在子宫内膜癌中表达及临床意义.docVIP

凋亡抑制基因存活素在子宫内膜癌中表达及临床意义[摘要]目的　结合临床病理学特征探讨Survivin在子宫内膜癌组织中的表达。方法应用免疫组化sP法检测60例子宫内膜癌、33例癌旁组织和20例正常子宫内膜标本中Survivin蛋白的表达情况。结果Survivin蛋白在内膜癌组的阳性表达率为66.7％，显著高于正常内膜组10.0％及癌旁组织组9.1％(P1/2)及发生淋巴结转移的组织标本中的阳性表达率高于临床早期(I一Ⅱ期)、组织学分化好(G1级)、肌层浸润浅(≤1/2)及未发生淋巴结转移组(P1/2)15例。发生淋巴结转移者13例。全部患者术前均未经放射治疗和化学治疗。另取癌组织旁开0.4cm取癌旁组织33例，并选取因其他妇科疾病而手术切除的正常子宫内膜标本20例作为对照组。 1.2　试剂　兔抗人survivin基因多克隆抗体sP免疫组化试剂盒，DAB显色试剂盒均购于福州迈新生物技术开发公司。 1.3　实验方法　免疫组化染色法：石蜡包埋组织切片常规脱蜡后，微波修复抗原，经内源性过氧化酶阻断剂孵育15min，10％正常兔血清封闭非特异性背景10 min。然后用3步SP法染色。DAB显色，苏木素复染，透明，封片镜检。用PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。实验步骤按试剂盒说明进行。 1.4　染色特征及结果判定survivin结果判定 参照文献进行：阳性染色主要定位于子宫内膜腺上皮细胞浆(偶见于胞核)阳性物质呈淡黄色或黄色颗粒状，染色强时可呈棕褐色。(1)根据每张切片中细胞染色强度评分：细胞内无染色为0分；浅黄色为1分；棕黄色为2分；棕褐色为3分；(2)按组织切片中的阳性染色细胞数占全部肿瘤细胞百分比记分(随机取10个高倍镜视野的平均数)：≤5％为0分，～20％为1分，～50％为2分，～75％为3分，75％为4分；(3)按上述两项指标的分数乘积高低分为：0～1分为阴性(－)，2～4分为弱阳性(+)，5～8分为中度阳性(++)，9～12分为强阳性(+++)。 1.5　统计学方　法采用SPSS13.0软件包进行统计分析。样本构成率间的比较采用x2检验，JP0.05认为差异无统计学意义，P0.05)，但均显著低于内膜癌组的表达率66.7％(40/60)(P1/2)及发生淋巴结转移的组织标本中的阳性表达率高于临床早期(Ⅰ～Ⅱ期)、组织分化好(G1级)、肌层浸润浅(≤1/2)及未发生淋巴结转移组的阳性表达率(P0.05)，认为Survivin高表达是内膜癌发生中的早期事件。Pallares等报道Survivin在内膜癌中的表达较正常增殖期内膜高，但与病理类型、组织学分级、手术病理分期、生存率、分裂及调亡指数差异无统计学意义。 本实验结果与很多国内外的研究相似，Survivin在正常子宫内膜、癌旁组织及子宫内膜癌组织中均存在不同程度的表达，它们的阳性率呈上升趋势。子宫内膜癌组与正常子宫内膜组、癌旁组织比较，阳性率差异有统计学意义(P0.05)，可能是由于两者病理性质比较相似所致。在子宫内膜癌中，随组织学分级、手术分期的升高，Survivin的过表达率也升高，G2、G3组与G1组相比有显著性差异。这些现象说明了在异常增生的子宫内膜中，Survivin可能通过促进细胞的有丝分裂。同时抑制细胞的凋亡，打破增殖与凋亡的平衡，导致了子宫内膜癌的发生。提示Survivin蛋白的阳性表达可反映子宫内膜癌的恶性程度，是子宫内膜癌侵袭进展的标志，并在一定程度上反映预后，Survivin越高表达，恶性程度越高、预后越差。Survivin成为治疗子宫内膜癌的一个新的靶点。据此，我们认为定量检测Survivin在子宫内膜癌中的表达，对判断子宫内膜癌有重要临床意义。 1