力肺颗粒治疗慢性阻塞性性肺病药效学研究.docVIP

力肺颗粒治疗慢性阻塞性性肺病药效学研究慢性阻塞性肺病(COPD)是临床常见的慢性疑难病症，本病属祖国医学“喘证”范畴，久病多为虚症兼型，我院在临床观察发现肺肾气虚型多伴有血瘀，据此研制出力肺颗粒，给予大鼠力肺颗粒每日剂量灌胃，能够明显降低通过气管滴入LPS和被动吸烟30d建造的COPD大鼠模型血清中IL-8、TNF-α的含量。说明本品对COPD具有一定的治疗作用。现报道如下。 1　资料与方法 1.1　一般资料药品：力肺颗粒，济南市中医院提供，规格10异/袋，每日3次，每次1袋。功效为活血益气，肃肺平喘。主治COPD肺肾气虚兼血瘀型。气管炎丸，生产厂家：北京同仁堂，批号用量30粒Tid。动物：Wistar大鼠，40只，雄性，清洁级，体重(200+25)g，山东大学医学院实验动物中心提供，合格证号：SCXK(鲁合格证编号：0004219，每盒10只，雌雄分盒。购进后适应性饲养观察1d。试剂与仪器：离心机(型号LDZ4)北京医用离心机厂，IL-8试剂盒(IL-8 RIA Kit)批号：Lot L8p20027，TNF-α试剂盒(TNF-α RIA Kit)批号：TNF Lot LNF20029，(均为美国DPC公司产品)动物薰吸箱：济南市中医院呼吸科自制。 1.2　实验方法动物　分组及造模：将40只大鼠随机分为四组(1)空白组(10只)大鼠正常饲养。(2)模型组(10只)：分别于第1d、第14d气管内注入12S(μg/μL)；第2-30d(第14d除外)大鼠被动熏5％(v/v)将军牌过滤嘴香烟(焦油烟量15mg，烟气烟碱量1.0mg)烟雾，每日烟熏2次。具体方法为：每日上、下午分别将大鼠置于72L的密闭玻璃箱内。将香烟插在50mL注射针头上，点燃经玻璃箱顶盖的通气孔伸入玻璃箱，先缓慢抽吸烟雾于空针内。再将烟雾推入玻璃箱内，如此反复，使玻璃箱内烟雾浓度达到5％左右，大鼠被动吸烟30min。(3)力肺颗粒组(10只)：在制备COPD模型的同时，于每天熏香烟前按24gkg-1-d-1的剂量，灌服1g/mL浓度的力肺颗粒。(4)气管炎丸组(10只)：在制备COPD模型的同时，于每天熏香烟前按24gkg-1?d-1的剂量。灌服1g/mL浓度的气管炎丸。动物处死及标本处理：先将动物称重，腹腔内注入2％戊巴比妥钠(25mg/kg)曲麻醉，将大鼠仰卧位固定，在股动脉处取血约4mL，放于试管架中待自然凝固。凝固的血液以3000r/min的速度离心5min后。取血清测定IL-8及TNF-α的水平。IL-8、TNF-α的检测：严格按照IL-8、TNF-α检测试剂盒的说明，按规定的有关步骤采用放射免疫法测定。 1.3　统计学方法　全部数据用x±s来表示。用SAS8.0统计软件行t检验。 2　结果 各组大鼠血清中IL-8及TNF-α的浓度变化，见表1。 3　讨论 现代医学研究认为，COPD的发病多与肺对有害颗粒或有害气体的异常炎症反应有关，而炎性介质IL-8，TNF-α在异常反应中起着重要作用。本研究主要借助实验室检测手段以及动物试验，研究IL-8，TNF-α与COPD肺肾气虚兼血瘀证的发生发展之间的关系和力肺颗粒对IL-8，TNF-α水平的影响，探讨力肺颗粒治疗COPD肺肾气虚兼血瘀证的作用机制，开拓一种治疗COPD的新方法。本实验采用两次气管内注入适量LPS和反复烟熏的方法，制作COPD大鼠型。结果表明，模型组支气管肺组织病理形态学基本符合人类慢性支气管炎及阻塞性肺气肿的特点。而且，模型组血清IL28、TNF-α含量较空白组明显升高，说明此方法可用于COPD气道炎症病变的研究。 IL-8是选择性中性粒细胞趋化因子，IL-8在COPD气道炎症中的作用主要是通过趋化、激活中粒细胞而实现的。TNF-α是激活巨噬细胞分泌的一种具有多种免疫功能的调节因子，在COPD气道炎症中TNF-α可促进炎症细胞粘附、游走和浸润，迅速引起肺损伤：能诱导血管内皮细胞表达粘附分子。并能诱导气道上皮细胞和中性粒细胞生成IL-8。力肺颗粒以活血益气，肃肺平喘为治则。本研究发现应用力肺颗粒组的大鼠血清中IL-8，TNF-α的含量显著降低，并且与服用气管炎丸组的大鼠相比，具有更加明显的治疗效果，说明本品通过降低血液中IL-8，TNF-α的含量从而对COPD起到一定的治疗作用。 1