大鼠单胺类神经递质分布.docVIP

大鼠单胺类神经递质分布单胺类神经递质是中枢神经系统中一类神经递质，对哺乳动物的神经系统功能、内脏功能，以及对动物应激反应，特别是对中枢神经系统的兴奋或抑制起着协调作用。为进一步探讨有机磷农药对单胺类神经递质的影响，我们进行了基础性研究。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1流动相流动相为缓冲液(0.02 M柠檬酸三钠和?0.05 M磷酸氢二钠)∶甲醇=90∶10的溶液,经0.45 μｍ过滤器过滤并超声脱气后使用，重酒石酸去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺盐酸盐、5-羟色胺盐酸盐、内标(IS)3,4二羟苄胺溴酸盐均购自Fluka公司。上述标准品分别用0.1 M的高氯酸配成质量浓度为1.0 mｇ/mL的标准储备液,贮存于4℃冰箱内,分析时用0.1 M的高氯酸稀释。其余试剂为优级纯或分析纯试剂。实验用水均为二次蒸馏水。实验在室温下进行。 1.1.2动物成年雄性SD大鼠（150～250 g）8只（复旦大学动物实验部提供）。动物房室温25～30℃。 1.1.3仪器装置ＬＣ-10Ａ型高效液相色谱仪(日本SHIMADZU)、WATERS460电化学检测器(美国WATERS公司),SrAdv色谱工作站(上海军锐信息技术开发有限公司)。玻碳电极为工作电极,Ａｇ/ＡｇＣｌ电极为参比电极,设定电压为?+650 ｍＶ。Ａｌｌｔｅｃｈ ＯＤＳ柱(200 ｍｍ×46 ｍｍ)带有一个15 ｍｍ×?46 ｍｍ保护柱。MicroMax RF高速离心机(北京医用离心机厂),LXJ-ⅡB低速离心机(北京医用离心机厂)。 1.2方法 1.2.1SD大鼠血液样品的预处理断头处死SD大鼠，从大鼠头部取出2 mL血液经3 600 ｒ/ｍｉｎ离心3 ｍｉｎ。 1.2.2SD大鼠血清样品的制备及预处理血液经离心后取出200 μL的血清，在血清中加入2 mL正丁醇，经震荡处理3min，然后经10 000 ｒ/ｍｉｎ离心15 ｍｉｎ，加入0.5 mL 0.1M高氯酸、正庚烷2 mL，经震荡处理3 min，然后经360 r/min离心3 min,除去有机相，加入氯仿2 mL,经震荡处理3 min，然后 360 r/min离心3 min, 取上层水样直接进样，进样量均为20.0 μL。 1.2.3SD大鼠大脑样品预处理将SD大鼠的脑分为小脑、丘脑、海马、纹状体、脑干、大脑皮层,分别加入2 mL正丁醇，分2次提取，然后经10 000 ｒ/ｍｉｎ离心15 ｍｉｎ，加入0.5 mL 0.1M的高氯酸、正庚烷2 mL，经震荡处理3 min，再经3 600 ｒ/ｍｉｎ离心3 ｍｉｎ，除去有机相，加入氯仿2mL,经震荡处理3 min，然后再经 3 600 ｒ/ｍｉｎ离心3ｍｉｎ，取上层水样直接进样，进样量均为20.0μL。 1.3色谱分析 用高效液相色谱仪对上层水样进行色谱分析，色谱分析条件，玻碳电极为工作电极,Ａｇ/ＡｇＣｌ电极为参比电极,设定电压为+650 ｍＶ。Ａｌｌｔｅｃｈ ＯＤＳ柱(200 ｍｍ×46 ｍｍ)带有一个?15 ｍｍ×46 ｍｍ保护柱。 2结果 去甲肾上腺素(ＮＥ)在海马中含量最高，在脑干中含量最低；肾上腺素(Ｅ)在脑干中含量最高，大脑皮层含量最低；多巴胺(ＤＡ)在纹状体含量最高，海马含量最低；5－羟色胺(5-ＨＴ)在血清中含量最高，大脑皮层、小脑含量最低(表1)。 3讨论 对正常SD大鼠的单胺类神经递质分布的研究，为进一步开展有机磷农药等外来化学物对单胺类神经递质的影响奠定了基础。单胺类神经递质是一类重要的中枢神经递质，不同单胺类神经递质在大脑结构中及血清中的含量分布不同,反映靶器官功能的不同，有的单胺类神经递质起着兴奋作用，有的起着抑制作用，在正常情况下抑制与兴奋处于平衡状态，一旦外来化学物破坏了这种平衡，就会造成各种损害，在临床上表现为各种神经行为疾病。所以研究正常SD大鼠的单胺类神经递质的分布，对阐明有机磷农药对单胺类神经递质的影响都有重要的意义。 本实验探讨了正常SD大鼠的单胺类神经递质分布情况，所得出的结果有待于进一步验证。 (收稿日期：2007-02-27) 注：“本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文” 1