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胃肠安丸中厚朴酚及及厚朴酚快速提取及测定【摘要】 目的 快速提取及测定胃肠安丸中厚朴酚及和厚朴酚。方法 用ASE-300型快速溶剂萃取系统进行快速萃取胃肠安丸中厚朴酚及和厚朴酚，利用反相高效液相色谱法（HPLC）测定厚朴酚及和厚朴酚的含量，Diamonsil(TM)C18柱(250 mm×4．6 mm，5μm)，流动相：甲醇-水-冰醋酸(79∶21∶0．25)，流速：1．0 ml/min，检测波长：294 nm，柱温∶23℃。结果 HPLC法测得在范围内呈良好线性关系，和厚朴酚的平均回收率为99．91%，RSD为1．70%；厚朴酚的平均回收率为99．50%，RSD为0．83%。结论 本方法简便、准确、专属性强，能有效地控制胃肠安丸的质量。? 【关键词】厚朴酚；和厚朴酚；胃肠安丸；RP-HPLC 胃肠安丸是木香、沉香、枳壳(麸炒)、檀香、大黄、厚朴(姜制)、朱砂、麝香等中药组成[1]。具有芳香化浊，理气止痛，健胃导滞的功能。用于消化不良引起的腹痛，肠炎，菌痢，脘腹胀满，腹痛，食积乳积。现代药理学研究表明,厚朴具有抗菌、抗病毒、抗过敏、影响胃肠活动、肌肉松弛和中枢抑制等作用[2]。厚朴中的厚朴酚及和厚朴酚是起主要药理作用的化合物，最近的研究表明，其中厚朴酚[3]与和厚朴酚[4]有抑制癌细胞的作用,厚朴酚与和厚朴酚将会有更加广泛的医药用途。提取及测定这两种酚是控制胃肠安丸制剂质量的主要方式。? 本文进行了新的提取及测定胃肠安丸中厚朴酚及和厚朴酚方法的研究，用ASE300型快速溶剂萃取系统进行快速萃取厚朴酚及和厚朴酚，利用反相高效液相色谱法测定厚朴酚及和厚朴酚的含量，结果理想，报告如下。 1 材料与方法 1．1 材料与试剂 胃肠安丸为某制药公司上市产品。提取用无水乙醇、甲醇为分析纯，HPLC甲醇为色谱纯,厚朴酚、和厚朴酚标准品由中国药品生物制品检定所提供。 1．2 仪器 美国DIONEX公司ASE300型加速溶剂萃取机；美国DIONEX公司P680LPG型高效液相色谱仪；RE-52型旋转蒸发仪。 1．3 方法 1．3．1 胃肠安丸中酚类物质的快速提取 用ASE300型快速溶剂萃取机进行，采用优选的方法提取，取干燥的胃肠安丸,粉碎，过60目筛，取3．0 g，按4∶1的比例加入硅藻土混匀后装入萃取池，编程进行萃取实验(萃取压力为1 500 psi、酒精度60%、提取3次、提取温度71℃、提取时间为10 min/次),萃取结束后，用RE-52型旋转蒸发仪浓缩，定容至25 ml，取样进行HPLC测定含量。 1．3．2 HPLC色谱条件 色谱柱：Diamonsil(TM)C18(250 mm×4．6 mm，5 μm)，流动相为流动相：甲醇-水-冰醋酸(?79∶21∶0．25?)，进样量：20 μl。 1．3．3 线性范围考察 精密称取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量，加甲醇制成每1 ml含厚朴酚以及和厚朴酚均为400，200，100，50，25，12．5，6．25 μg的标准品浓度梯度，分别吸取溶甲醇-水-冰醋酸(79∶21∶0．25)，流速为1．0 ml/min，检测波长：294 nm，柱温：23℃，进液20 μl,注入HPLC仪测定。以对照品浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，进行线性回归。 1．3．4 精密度试验 取快速萃取制备的样品溶液，重复进样6次，记录色谱峰面积，计算RSD。 1．3．5 重复性试验 用快速萃取方法制备5份供试品溶液，依RP-HPLC法测定厚朴酚与和厚朴酚的色谱峰面积，计算RSD。 1．3．6 稳定性试验 取样品，每隔2 h进样1次，共进样6次，考察供试品溶液的稳定性。 1．3．7 回收率试验 取已测知含量的样品6份，分别精密加入对照品适量，依RP-HPLC法测定，计算回收率，RSD。 2 结果 2．1 HPLC结果及标准品线性关系 在前述色谱条件下，厚朴酚与和厚朴酚与其他成分能够很好地分离(图1)；以对照品浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，进行线性回归。厚朴酚浓度在6．25~400 μg/ml和厚朴酚浓度在6．25~400 μg/ml范围内与峰面积线性关系良好。回归方程为：厚朴酚Y=0．435991X+3．423161，R：0．999694；和厚朴酚Y=0．609061X+4．516839，R：0．999526。? 2．2 精密度试验结果 取快速萃取制备的样品溶液，重复进样6次，记录色谱峰面积，计算得厚朴酚与和厚朴酚的RSD分别为0．85%,1．02%。 2．3 重复性试验 用快速萃取方法制备5份供试品溶液，依RP-HPLC法测定厚朴酚与和厚朴酚的色谱峰面积，计算RSD。计算得厚朴酚与和厚朴酚