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贲门腺癌经典多药耐药机制探究【摘要】 目的 研究贲门腺癌经典多药耐药机制。方法 用流式细胞术检测55例贲门腺癌患者癌组织和距离肿瘤5 cm以上癌旁正常组织P糖蛋白。结果 55例贲门腺癌组织P糖蛋白阳性表达率为50．9%,癌旁正常组织未见P170表达，两者差别有统计学意义。结论 贲门腺癌存在经典多药耐药机制,检测癌组织P糖蛋白对化疗药物选择及逆转多药耐药具有重要意义。? 【关键词】贲门肿瘤；P糖蛋白；流动血细胞计数 Study on typical multidrug resistance mechanism of cardiacadenocarcinoma PENG Xue-hong,CHEN Nuan,XU Jian-heng，et al.Department of Chest Surgery,The First Affiliated Hospital ofMedical College of Shantou University,Shantou Guangdong Province 515041,China ? 【Abstract】 Objective To study the typical multidrug resistance mechanism of cardiac adenocarcinoma.Methods The expression of P170 protein in 55 cases of cardiac adenocarcinoma was detected by flow cytometry.Results The positive expression rate of P170 protein was 50．9%in 55 cases of cardiac cancer tissue.Normaltissue near cancer has no positive expression of P170 protein.There was an obvious difference between normal and cancer tissue.Conclusion There was typical multidrug resistance mechanism in cardiac adenocarcinoma,detection of P170 protein expression in cancer tissue had significance in selection of chemotherapeutic drugs andMDR reversion.? 【Key words】Cardiac neoplasms；P-glycoprotein；Flow cytometry 在肿瘤的治疗方法中，化疗占据着不可替代的地位。自从化疗药物应用于临床以来，虽对少数恶性肿瘤的治疗取得了成功，但在大多数恶性肿瘤中收效却不大，这其中一个很重要的原因就是肿瘤细胞对化疗药物产生了耐药性。本文应用流式细胞术检测贲门腺癌P糖蛋白(p-glycoprotein，P-gp)，研究由P糖蛋白介导的经典多药耐药机制。? 1 资料与方法? 1．1 一般资料 近2年住院手术的贲门腺癌患者55例，男47例，女8例。 年龄47~76岁。入选标准：术前经胃镜病理活检确诊为贲门腺癌，术前未接受化疗，肿瘤病灶起源于贲门，性别、年龄不限。术中取贲门癌组织及距离肿瘤5 cm以上癌旁正常组织各1块，采用流式细胞术，检测P糖蛋白。? 1．2 试剂 鼠抗人MDR产物，(P-gp)单克隆抗体(Immunotech公司，法国)，FITC标记兔抗鼠Ig(Dako公司，丹麦)。? 1．3 流式细胞仪检测方法? 1．3．1 实体瘤组织单细胞悬液制备 术中取新鲜贲门癌及距离肿瘤5 cm以上正常癌旁组织0．2~1．0 g，以生理盐水洗去血迹，至于重叠的100目铜网和260目尼龙网上，以眼科剪剪成1 mm?3碎块，在以眼科镊夹持组织在铜网上轻挫，边挫边以磷酸盐缓冲液(PBS)将挫下的细胞洗入网下的平皿内，直至组织挫完。将收集的细胞悬液以260尼龙网过滤1次去除组织碎块，收入10 ml试管内离心(1500 r/min ，10 min)， 弃去上清再以PBS漂洗，同前述方法离心2次，均弃上清，备用。? 1．3．2 免疫标记 标记前用PBS漂洗离心1次(1 500 r/min，10 min)以去除固定剂，再将每份悬液分2管，其一加20 μl P170工作液(一抗)，其二加20 μl羊抗鼠IgG(一抗)工作液，室温下20 min，离心(2 000 r/min，5 min)，除上清后加1