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高效液相色谱法测定口炎清片中绿原酸含量
高效液相色谱法测定口炎清片中绿原酸含量【摘要】 目的 建立以高效液相色谱法测定口炎清片中绿原酸含量的方法。方法 色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相：乙腈-0．4%磷酸溶液（13∶87）为流动相；检测波长为327nm，流速为1．0 ml/min，柱温：30℃，进样量10 μl。结果 绿原酸在0．053 4～0．534 g（r=0．999 9）之间呈良好的线性关系。 绿原酸平均回收率:99．38%（RSD=1．31%,6例）。结论 本方法简便、准确、重现性好。
【关键词】 口炎清片；绿原酸；高效液相色谱法
Determination of Constiuent in tablet of kou yan qing by HPLC
MENG Xing-yun,ZHAO Ruu-qin;FANG Dong-jun,The six pharmaceutical Factory of Haerbin pharmaceu-tical group．harerbin 150056,China
【Abstract】 Objective To establish a method of HPLC determination of chlorogenic acid in tablet of Kouyanqing.Methods SHIM-PACK-C18 column was used with a mobile phase of acetonitrile－4% phosphoric acid（13∶87）;detector wavelength 327nm; flow rate 1．0 ml/min; column temperature at 30℃;injecting volume 10 μl. Results Chlorogenic acid showed the good linear relationship at the range of 0．0534 g～0．534 g（r=0．9999）respectively；it average recoveries was:99．38%（RSD=1．31%,6）respectively.Conclusion The methods is simple, accurate and reproducible.
【Key words】Tablet of Kouyanqing；Chlorogenic acid；HPLC
口炎清片是在原口炎清颗粒的基础上进行的中药改剂型，有滋阴清热，解毒消肿的功能。用于阴虚火旺所致的口腔炎症。在对原剂型改革的同时，对原质量标准也进行了提高。建立了以高效液相色谱法测定口炎清片中绿原酸含量的方法，对提高中药制剂质量监控，完善质量标准体系具有实际应用意义。
1 仪器与试药
1．1 仪器
日本岛津CS-Light 工作站（日本岛津LC-10ATVP泵），日本岛津HPD-10ATVP紫外检测器。
1．2 试药
绿原酸(编号11805-200306)中国生物制品检定所，口炎清片（本单位自行改剂型研制，批号070417）。乙腈为色谱纯，所用其他试剂均为分析纯。
2 结果
2．1 色谱条件[1] 色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂, 日本岛津SHIM-PACK色谱柱（4．6 mm×150 mm,5 μm）。
流动相：乙腈-0．4%磷酸溶液（13∶87）为流动相；流速：1．0 ml／min；柱温：30℃。检测波长：327 nm；进样量10 μl。
2．2 对照品溶液的制备
精密称取对照品绿原酸2．67 mg，加入50%甲醇适量使溶解，并转移至25 ml容量瓶中，用50%甲醇稀释至刻度，制成每1 ml含绿原酸0．106 8 mg的溶液。
2．3 线性关系考察
精密吸取“2．2”项下对照品溶液0．25、0．5、1．0、1．5、2．0、2．5 ml分别转移至50 ml棕色容量瓶中，加50%稀释至刻度，分别精密吸取上述溶液各10 μl，按“2．1”项下色谱条件进样，测定峰面积，分别以绿原酸峰面积积分值(A)为纵座标，进样浓度(C)为横座标进行线性回归，得绿原酸回归方程为：y＝8 490．38+1 350 129．031x（r＝0．999 9）,在0．053 4～0．534 g之间呈良好的线性关系。
2．4 稳定性试验
取同一批号口炎清片（批号070417）15片，除去薄膜衣，研细，取粉末0．5 g，精密称定，按“2．8”项下方法操作，再精密吸取供试品溶液10 μl，根据设定间隔时间0、1、2、3、4、5 h，按“2．1”项下色谱条件进样，测定峰面积。结果，绿原酸平
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