第二章提取分离鉴定方法和技术.docVIP

天然药物化学成分的提取、分离与检识 学习目标1 学习目标 1．掌握各种提取、分离和鉴定的适用范围、操作要点及天然药物化学成分的鉴定顺序； 2．熟悉各种提取、分离和鉴定的基本原理和影响因素及各种常用谱技术在天然药物化学成分结构测定中的应用； 3．了解溶剂的极性和选用原则及提取液的浓缩方法； 4．能够熟练安装各种提取装置。 5．能够利用香豆素的有关性质进行荧光鉴别和色谱鉴别。 第一节 天然药物有效成分的提取技术 天然药物化学成分较为复杂，所以想研究和应用其中的有效成分，必须将它们从天然药物中提取出来并进一步加以分离和精制，得到有效单体，这样就必须经历提取→分离→鉴定三个程序，所以选择正确的提取、分离和鉴定的方法和技术尤为重要。 对天然药物中有效成分的提取分离存在两种情况：一种是已知目的物的成分或化学结构类型，可以通过先查阅有关资料，搜集和比较各种有关的提取方案，尤其是工业生产法，然后根据具体条件进行筛选加以选用；另一种是从天然药物中寻找未知有效成分或有效部位时，情况比较复杂，一般应根据预先确定的目标，进行预实验，在适当的活性测试体系指引下，通过逐步提取、分离追踪，以及相应的动物模型筛选，临床验证，反复实践，才能达到目的。由于天然药物所含成分种类繁多，含量有高有低，所以天然药物有效成分的提取、分离和鉴定是一项十分艰巨而细致的工作，同时还要做到具体问题具体分析，灵活运用各种提取分离方法，不能千篇一律，拘泥于一种方法。本章仅就常用的提取分离鉴定的方法、原理和操作技术作一概括性的介绍，涉及具体的某一有效成分的提取分离方法，将在各论中介绍。 第一节 天然药物有效成分的提取技术 提取就是用适当的溶剂将拟研究的化学成分从动物或植物等药材的组织中抽提出来的过程。天然药物成分复杂，其中主要有糖类、蛋白质、脂类、叶绿素、树脂、树胶、鞣质和无机盐等，一般认为这些物质在药用上是无效成分或杂质，但是在有些情况下，这些成分则是有活性的有效成分，如葡萄属植物中的多酚、栝楼根中的蛋白质等，现在被证明是活性显著的物质。而大多数次生代谢产物如生物碱、萜类、黄酮、香豆素、醌类、有机酸、氨基酸和各种苷类化合物等，虽然在植物体里含量少，但是它们却具有较强的生物活性，有些已经应用在临床，因此被认为是有效成分。由此可见，有效成分和无效成分的划分不是绝对的，随着科技的发展，它们在一定条件下可以相互转化。在提取分离时，应尽量设法使用目标成分被充分提取出来，同时使杂质不被提出或尽量少的被提出或在纯化处理的过程中尽可能的除去，最后获得纯度较高的有效成分，因此，天然药物的提取过程就是去粗取精的过程。 一、溶剂提取法 溶剂提取法是实际工作中提取有效成分最常用的方法，一般溶剂不同，浸出的成分也不同。溶剂提取法主要是根据化合物在极性相似的溶剂中有较好的溶解性即“相似相溶”这一原理进行的。所谓极性就是分子中电荷的不平均分布，也可想象成电子云的不平均分布导致极性的产生。溶剂也可按其极性大小顺序进行分类：水、亲水性有机溶剂、亲脂性有机溶剂三大类。溶剂的极性与介电常数ε有关，介电常数越大，极性越大。常用溶剂的极性由小到大的顺序如下： 石油醚＜苯＜无水乙醚＜氯仿＜乙酸乙酯＜丙酮＜乙醇＜甲醇＜水 表2-1常用溶剂的介电常数 溶剂名称 介电常数（ε） 溶剂名称 介电常数（ε） 石油醚 苯（C6H6） 乙醚(无水，Et2O) 氯仿(CHCl3) 乙酸乙酯(EtOAC) 1.8 2.3 4.3 5.2 6.1 正丁醇(n-BuOH) 丙酮(Me2CO) 乙醇(EtOH) 甲醇(MeOH) 水(H2O) 17.5 21.5 26.5 31.2 80.0 这些溶剂中，水的极性强，穿透力大，天然药物中一些极性大的化合物如糖、蛋白质、氨基酸、鞣质、有机酸盐、生物碱盐、大多数苷类、无机盐等亲水性成分可溶于水，使用水作为提取溶剂有安全、经济、易得等优点，但是缺点是水提取液（尤其是含糖或蛋白质者）易霉变，难以保存，而且不易浓缩和滤过；亲水性有机溶剂是指甲醇、乙醇、丙酮等极性较大的且能与水相互混溶的有机溶剂，其中乙醇最为常用，能以任意比和水混溶，溶解极性成分，同时具有较强穿透能力，对一些亲脂性成分也有较好的溶解性能，因此提取范围较广，提取效率较高，且提取液易于保存、虑过和回收，但这类有机溶剂的缺点是易燃，价格较贵，有些溶剂毒性较强。 依据相似相溶原理，天然药物中的亲水性成分易溶于极性溶剂，亲脂性成分则易溶于非极性溶剂中。因此，在实际工作中课根据具体情况，针对药材中