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表3.基础医学院 医学生物学系 研究生课程简介
课程名称:细胞生物学实用技术
英文名称:Applied technology of Cell Biology
教学方式:大课讲授
考核方式:实验报告(开卷)
适用专业:医学各专业 适用层次:硕士
开课学期:第二学期 讲授学时:32学时 学分:2
先修课程要求: 课程组教师姓名 职称 专业 年龄 学术专长 王小丽 副教授 细胞生物学 发育细胞生物学 彭 挺 讲师 细胞生物学 分子细胞生物学 蔡 蕾 讲师 细胞生物学 分子细胞生物学 陆胜军 讲师 细胞生物学 分子细胞生物学 教学大纲:
细胞生物学从细胞的整体、亚微结构和分子水平研究细胞的结构、功能及其生命活动规律。细胞分子生物学实用技术以细胞生物学的基本理论知识为基础,学习细胞生物学研究的实用技术,如细胞培养技术,细胞器及其他化学成分显示(常用荧光染料的使用和细胞原位杂交方法),介绍荧光显微技术、相差显微镜技术、摄像显微技术、流式细胞仪、激光扫描显微镜工作原理与应用;绿色荧光蛋白等基因转染哺乳动物细胞,标记特定细胞器(如内质网、微管、过氧化物酶体、细胞核),以观察活体细胞中相应细胞器的动态变化,显示特定蛋白质在细胞中的动态分布。
本课程是一门理论性、技术性很强的课程。教学过程理论与实践相结合,使学生掌握细胞生物学研究的实用技术和方法,了解一些高级仪器的工作原理及应用,为研究生硕士论文课题研究提供技术学习和实践机会,为从事相关课题的研究奠定基础。实验内容包括:
一、细胞原代培养、观察
二、细胞传代培养、冻存、复苏
三、荧光及相差显微镜的工作原理与使用、显微摄影与显微测微尺
四、各种荧光染料显示细胞核、线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体、细胞骨架
五、荧光蛋白质粒转染真核细胞与细胞器定位
分别用红、绿、黄、青色荧光蛋白质粒转染真核细胞,标记线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体、微管、微丝等细胞器,荧光及相差显微镜观察
六、Brdu标记S期细胞
七、细胞姐妹染色单体交换与细胞周期测定
八、细胞质分裂阻断与微核分析
九、细胞集落形成率
十、细胞生长、分裂曲线绘制
十一、绿色荧光蛋白-细胞色素c融合蛋白质粒的构建、线粒体荧光定位及凋亡观察系列实验
目的:构建绿色荧光蛋白-细胞色素c的融合蛋白,转染真核细胞,实现线粒体的绿色荧光定位。观察细胞凋亡过程中的细胞色素c释放过程。
实验要点:
1.细胞色素c序列的获得
2.细胞色素c与pEGFP质粒的融合
3.重组质粒的原核扩增
4.重组质粒的真核转染及细胞器荧光定位
5.凋亡过程中细胞色素c释放的荧光观察
教材:余从年等:细胞分子生物学实用技术 主要参考书:
A1berts B et al:Molecular Biology of the Cell.Garland Pub.,Inc.2002
Lodish H et al: Mo1ecular Cell Biology.4thed. W.H.Freeman and Company and Sumanas. 2003
D.L.斯佩克特 等著 黄培堂等译:细胞实验指南
刘鼎新等主编:细胞生物学研究方法与技术
章静波主编:细胞生物学实用方法与技术 该课程所属基层教学组织(教研室、系)专家小组意见,该课程是否适合硕士、博士研究生培养的需要?是否与其他课程重复,是否有稳定授课教师队伍。
《细胞生物学实用技术》课程适合临床各专业硕士生培养的需要,我系教师具有多年教学经验,结合最近研究成果,编写了相应教材,具有稳定的课程组和授课教师队伍,完全达到了硕士研究生预定的培养目标。
专家组长 李和
专 家 余从年 刘能保 2008年 01 月 10 日
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