中国植物源农药的进展.PPT

第十章 农药生物测定与田间药效试验 Key Laboratory of Natural Pesticide Chemical Biology, Ministry of Education, South China Agricultural University 第一节 农药的生物测定 一、概述 二、生物测定试验设计的基本原则 三、供试材料 四、室内毒力测定的方法 五、杀菌剂的毒力测定方法 六、除草剂的毒力测定方法 七、杀线虫剂的毒力测定方法 八、实验结果的统计与分析 一、概述 农药生物测定的概念： 生物活体或者离体组织、细胞 以及细胞中的活性物质 化合物 生物测定的应用 活性筛选的常规测定 农药残留的微量生物分析 抗性毒力测定 药害毒性测定 二、生物测定试验设计的基本原则 相对的控制环境条件 必须设立对照 处理必须设重复 运用生物统计分析试验结果 三、供试材料 应参考的原则 1、在室内认为环境条件下，应用较简便、快速的繁殖技术，可保证全年定时大量供应，不受季节限制； 2、应是广泛发生危害的主要农林有害生物，具有重要的经济意义，而且在分类地位上有一定代表性； 3、对药剂的敏感性符合要求，试验时易操作。 我国常采用的生物种类 昆虫和螨类: 家蝇和库蚊等 病原菌：稻瘟病菌、水稻纹枯菌、小麦条锈病菌、马铃薯晚疫病菌等 杂草：野燕麦、看麦娘、苋、荠菜、播娘蒿和藜等 四、室内毒力测定的方法 （一）杀虫剂的毒力测定方法 1、常规活体生物测定 （1）触杀作用 喷雾法、喷粉法、浸液法、点滴法、注射法和药膜法 （2）胃毒作用 饲喂法——饲喂叶片法和饲喂毒饵法 饲饮法——适用于蝇类、蝽类等有吸食习性的昆虫，自由饲饮法和强制饲饮法。 （3）熏蒸作用： 气态的形式与昆虫接触 密闭环境 （4）内吸作用： 直接测定法和间接测定法 基本原理——将药剂通过处理植物的某一特定部位后，药剂能被植物吸收，并通过传导，到达其他部位，让昆虫取食未直接用药的部位后观察昆虫是否中毒死亡，以判定药剂是否具此特性。（直接测定法） （5）拒食作用：依据是昆虫的取食量或昆虫对食物的所食部位和昆虫体重的变化 叶碟法 拒食率（%）= （6）引诱作用 （7）趋避作用 （8）生长发育和生育干扰作用 脑激素、保幼激素、蜕皮激素和几丁质受干扰 生长、变态、滞育等生理现象发生改变 2、细胞水平及分子水平的生物测定 预期作用靶标抑制活性的测定 MTT法 生物传感器 生物芯片 3、高通量筛选（high throughput screening，HTS） 微量化，快速，高效等特点 （二）杀螨剂的毒力测定方法 1、玻片浸渍法 2、叶片残毒法 3、叶碟浸渍法 五、杀菌剂的毒力测定方法 （一）基于离体平板培养的毒力测定方法 特点： 常用方法：抑菌圈法、生长速率法、孢子萌发测定法、对峙培养法和高通量筛选法。 高通量筛选法——活体筛选法和离体筛选方法 （二）组织筛选测定法 离体毒力测定脱离了植物本身，无法检测出药剂是否具有化学保护或化学免疫等活性。 组织筛选测定法（介于活体与离体）：适用于稻瘟病的剥离叶鞘法；适用于细菌病害的块根法；适用于大麦白粉病的芽鞘表皮法和适用于水稻纹枯病的蚕豆叶片法等。 六、除草剂的毒力测定方法 （一）对种子萌发的测定方法 培养皿法 黄瓜幼苗形态法 琼脂测定法 （二）植株生长量的测定方法 去胚乳小麦幼苗法 萝卜子叶法 （三）生理指标的测定方法 浮萍法 单细胞藻类法 希尔反应 酶水平测定方法 （四）高通量筛选 （1）活体筛选 代表性植物为测试对象 种子处理生长测试法 （2）离体筛选 对靶标酶抑制活性的测定方法 测定过氧化氢的方法 测定荧光变化的方法 七、杀线虫剂的毒力测定方法 （一）供试线虫的选择 （二）线虫的纯培养 （三）供试药剂活性测定 1、离体筛选 触杀法 熏蒸法 2、盆栽试验 土壤淋浴法 叶面喷雾法 八、试验结果的统计与分析 LD50/LC50或ED50/EC50及其标准误差和95%置信区间、药剂的毒力曲线、显著性检验。 第二节 农药田间药效试验 1、以药剂为主体的系统田间试验 田间药效筛选 田间药效评价 特定因子试验 2、以防治对象为主体的试验 田间药效试验包括小区试验、大区试验和大面积示范试验。试验结果用“药效”表示。 二、田间药效试验的基本要求与影响因素 1、试验地的选择 2、试验小区的设计 3、影响药效的因素 农药制剂 防治对象 环境条件 三、田间药效试验的调查内容与方