DNA 疫苗及其免疫途径的研究进展 - 中国医药生物技术.PDF

中国医药生物技术 2010 年 8 月第 5 卷第 4 期 Chin Med Biotechnol, August 2010, Vol. 5, No. 4 285 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.04.010 ·综述· DNA 疫苗及其免疫途径的研究进展 楚琰，吴兴安 DNA 疫苗 （DNA vaccine ）又称为核酸疫苗、基因疫苗， 是一种常用的方法。 是指将含有编码某种抗原蛋白基因序列的质粒载体作为疫 1.1 肌肉注射 苗，采用某种方法直接导入动物细胞内，然后通过宿主细胞 目前大部分研究者认为包括骨骼肌和心肌在内的横纹 的转录翻译系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白 肌系统是最有效的摄取外源基因的组织[4] 。肌肉组织具有安 的免疫应答，从而使被接种动物获得相应的免疫保护，以达 全、体积大、免疫接种容量大的优点，是一个可以长期分泌 到预防和（或）治疗疾病的目的。1990 年，Wolff 等[1]发现 治疗性蛋白的有效平台，能引起有效的体液和细胞免疫应 小鼠的骨骼肌细胞能捕获含外源基因的质粒并表达外源基 答，因此多被用来进行 DNA 免疫注射[5] 。但是肌肉组织缺 因，首次提出了基因免疫的概念。1992 年，Tang 等[2]将含 少相关的巨噬细胞、树突状细胞和淋巴细胞，故其抗原提呈 生长激素基因的质粒导入小鼠表皮细胞，88% 的被免疫小 能力较弱。将质粒 DNA 注射进入肌肉组织后，最多只有 鼠产生了抗生长激素抗体，二次免疫后抗体水平显著提高。 1% ~ 2% 的肌纤维被转染，而影响质粒 DNA 扩散的主要 随后的大量动物实验都说明在合适的条件下，DNA 接种后 屏障是肌束膜[4] 。尽管如此，但由于肌肉组织的骨骼肌细胞 既能刺激机体产生细胞免疫，又能产生体液免疫。于是，基 可通过 T 小管或沟隙摄取 DNA ，且可长时间持续表达， 因疫苗技术应运而生，并逐渐显示出作为第 3 代疫苗的优 因而其内化质粒 DNA 及表达编码基因蛋白的能力远优于 越性。 其他类型细胞，从而成为 DNA 疫苗最主要的免疫方法之 最近几年来，关于基因免疫的研究在世界范围内广泛展 一。DNA 转染的效率还与质粒 DNA 的大小、构型、肌细 开，所涉及的范围包括人和动物的各种细菌性疾病、病毒性 胞的状态等有十分密切的关系。一般而言，DNA 分子越小， 疾病、寄生虫病及肿瘤性疾病。目前，在医学上针对结核杆 越有利于肌细胞的摄取，反之则扩散和摄取的效率越低。超 菌、艾滋病病毒、流感病毒和 T 细胞淋巴瘤的基因疫苗已 螺旋闭合环状双链质粒构象对质粒进入肌细胞并在其中有 进入临床阶段；而针对乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、戊型 效表达是十分有利的；而线性或开环的双链质粒 DNA 的 肝炎病毒、狂犬病病毒、牛疱疹病毒、人乳头瘤病毒感染及 转染效率则较低。对肌细胞而言，处于再生状态的肌细胞摄 相关癌症、巨细胞病毒、淋巴细胞脉络丛脑炎病毒、疟原虫、 取质粒 DNA 的能力较强。 利什曼病、乳腺癌、肺癌、前列腺癌等的核酸疫苗也正处于 研究表明[6] ，肌肉内接种诱发的免疫类型以 Th1 型为 研究和开发之中。 主，包括激活 CD8+ 的 CTL ，CD4+ 的 Th1 细胞以及产 虽然 DNA 疫苗研究已经取得长足的进展，但多数 生 IgG2a 为主的 B 淋巴细胞，且所获得的免疫力随免疫 DNA 疫苗，尤其是针对大型动物和灵长类动物的 DNA 疫 次数增加而不断加强。其产生 Th1 型优势应答的机制除与 苗的免疫效果仍不理想，普遍存在免疫原性低、诱发的抗体 巨噬细胞和 NK 细胞活化产生 Th1