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生理学报 Acta Physiologica Sinica, April 25, 2009, 61 (2): 161-168 161 研究论文 C/EBP 同源蛋白介导的内质网应激相关凋亡途径参与腹主动 脉狭窄致大鼠心肌肥厚 1,2 1,* 1 1 1,2 2 张振英 ，刘秀华 ，孙 胜 ，荣 飞 ，郭晓笋 ，胡维诚 1 2 中国人民解放军总医院病理生理研究室，北京 100853 ； 山东大学医学院病理生理教研室，济南 250012 摘 要： 内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)是细胞对环境改变的适应性反应，但过度ERS 可诱导细胞凋亡。 C/EBP 同源蛋白(C/EBP homologous protein, CHOP)是ERS 相关凋亡途径中重要的信号分子。本实验旨在探讨CHOP 介导的ERS 相关凋亡途径在大鼠腹主动脉狭窄致高血压心肌肥厚发生、发展中的作用。健康雄性Wistar 大鼠85 只，随机分为模型组(n=45) 和对照组(n =40) ，模型组行腹主动脉狭窄术，对照组仅分离腹主动脉不行狭窄术，分别于术后1 d 、3 d 、7 d 、14 d 、 28 d 时观察各组血流动力学变化，测定全心重/ 体重比(HW/BW)和左心室重/ 体重比(LVW/BW) ，RT-PCR 技术检测左心室心 肌组织ERS 相关分子葡萄糖调节蛋白78 (glucose-regulated protein 78, GRP78)、钙网蛋白(calreticulin, CRT)和CHOP mRNA 表 达变化，Western blot 分析GRP78 、CRT 、CHOP ，以及凋亡相关蛋白Bax 和Bcl-2 表达变化。结果显示，腹主动脉狭窄可诱 导大鼠心肌肥厚，与对照组比较，术后7 d 模型组大鼠血压升高，心功能代偿性增加，HW/BW 和LVW/BW 显著增加。模 型组内质网分子伴侣CRT mRNA 表达于术后1 d 即发生显著上调，较对照组增加136% (P0.01) ，而蛋白在术后7 d 开始出 现显著变化，较对照组升高69.2% (P0.01)；GRP78 基因和蛋白表达均于术后7 d 显著增加，分别较对照组增加20% 和186% (均P0.01) ，在此后观察期间内CRT 和GRP78 mRNA 和蛋白均持续高水平表达。相关分析显示左心室内压最大上升速率 (+dp /dtmax)分别与CRT 蛋白表达(r=0.780, P0.01)和GRP78 蛋白表达(r=0.694, P0.01)显著正相关。长期ERS (14 d)可触发CHOP 凋亡途径，模型组大鼠心肌组织CHOP mRNA 和蛋白表达均于术后14 d显著上调，分别较对照组增加22.2% 和76.0% (均P0.01)， 同时促凋亡蛋白Bax 表达增加(较对照组增加41.1% ，P0.01) ，而抗凋亡蛋白Bcl-2 表达降低(较对照组降低25.5% ，P0.01) ； 相关分析显示CHOP 蛋白表达与Bax 表达正相关(r=0.654, P0.01)，而与Bcl-2 表达负相关(r = –0.671, P0.01) 。上述结果提示腹 主动脉狭窄早期即可诱导内质网分子伴侣表达变化，触发ERS ，长期ERS 诱导心肌细胞凋亡，CHOP 介导的ERS 相关凋 亡途径可能参与了心肌肥厚过程，推测心肌细胞凋亡参与了心肌肥厚及失代偿的调节，决定肥厚心肌失代偿的进程。 关键词：心肌肥厚；内质网应激；凋亡；C / E B P 同源蛋白 中图分类号：R3 63 .2 C/EBP homologous protein-mediated endoplasmic reticulum stress-related apoptosis pathway is involved in abdominal aortic constriction-induced myocar- dium hypertrophy in rats 1,2 1,* 1 1 1,2