0419;蔬菜水果中腈菌唑农药残留气相色谱(ECD)检测法;4000.docVIP

蔬菜水果中腈菌唑农药残留气相色谱(ECD)检测法 摘要：腈菌唑作为一种麦角甾醇生物合成抑制剂，具有持效期长、对农作物安全、药效号、强内吸性等特点，可以有效预防和治疗很多蔬菜水果生长过程中的常见疾病，如：梨、苹果的黑星病、锈病和白粉病；烟草的白粉病；麦类的网斑病、大麦条纹病、小麦茎枯病、网腥黑穗病、坚黑穗病、散黑穗病；葡萄的白粉病和黑腐病；核果的腐烂病、污点病、褐锈病、白粉病等。腈菌唑作为农药，在农作物上使用之后，虽然多数会发生转化，但是农作物中仍然会残留一些农药，如果长时间摄入食物中残留的农药，会对人体的健康造成很大的威胁，所以必须重视农药的残留量。在20世纪60年代，就已经有人开始应用薄层色谱酶抑制法检测有机磷农药在食物中的残留量，发展到80年代，开始使用酶抑制和免疫检测技术来对农药残留量进行检测，近年来，我国也开始充分应用气相色谱法对食物中农药残留量进行检测，具有误差小、操作简单、处理速度快等诸多优势。本文研究以柑橘为例，使用气相色谱检测法检测蔬菜水果中腈菌唑的农药残留。 关键词：气相色谱检测法；腈菌唑；蔬菜水果；农药；残留 近年来，我国蔬菜出口发展情况虽然比较平稳，但是由于一些发达国家为了抵制外来产品，保护本国市场，越来越频繁的应用技术性贸易壁垒。尤其是在蔬菜水果中的腈菌唑残留检测，已经成为北美、欧盟等发达国家进出口蔬菜和水果的必须检测项目。所以，使用气相色谱检测法检测蔬菜水果中腈菌唑的农药残留，一方面，有利于保护食用者的身体健康，另一方面，也有利于促进产品的出口。 1.实验试剂和仪器 本次研究所需试剂主要包括：固相萃取小柱：Varian bond silica（1克，6毫升）；腈菌唑标样：纯度超过96.0%；无水硫酸钠：550摄氏度灼烧4小时；氯化钠：140摄氏度烘烤4小时；农残级二氯甲烷、正乙烷、丙酮等。本次研究所需仪器主要包括：气相色谱仪：带电子捕获检测器；分液漏斗；电动震荡仪；旋转蒸发器等[1]。 2.实验操作 2.1提取腈菌唑 取10克腈菌唑，和柑橘的全果、果肉、果皮搅匀，放入100毫升的具塞量筒中，加入20毫升的乙腈，匀浆2分钟。然后加入3克氯化钠，匀浆1分钟。以每分钟3500转的速度进行5分钟的离心，使水相和乙腈分层。 2.2石墨化炭黑柱-氨基柱组合净化 在具塞量筒中吸取10毫升的乙腈相溶液，置入150毫升的烧杯中，将烧杯放在65摄氏度的水浴锅上加热，对乙腈进行蒸发。用1毫升、体积比例为1:3的乙腈-甲苯溶液，对烧杯中的试样残渣进行溶解，转入石墨化炭黑柱-氨基柱。再使用1毫升、体积比例为3:1的乙腈-甲苯溶液，对烧杯进行清洗。使用10毫升、体积比例为3:2的乙腈-甲苯溶液，对石墨化炭黑柱-氨基柱进行清洗，取出洗脱液。在水浴锅中蒸发，加入体积比例为2:8的丙酮-正乙烷，定容至5毫升，进行气相色谱分析[2]。 2.3气象色谱分析 升温程序：在100摄氏度下保持1分钟，然后以每分钟20摄氏度的速度，升温至180摄氏度。然后以每分钟10摄氏度的速度，升温至300摄氏度，保持6分钟。 进口温度：260摄氏度；进样量：1微升；载气：氮气（≥99.999），流速每分钟1毫升；氢气：每分钟1.5毫升；空气：每分钟145毫升；NPD温度：300摄氏度；进样方式：不分流进样，0.75分钟后，打开分流阀和隔垫吹扫阀[3]。 3.结果 3.1提取方法和净化方法的选择 在提取方法上，乙腈是农药残留分析中最常用的提取溶剂，可以和水互溶。加入氯化钠之后，可以和水分层，并且不会受到蛋白质、脂肪、糖类等杂质的干扰，提取腈菌唑的效果较好。本次研究对乙腈和甲醇的提取腈菌唑效果进行了比较，用甲醇萃取样品加入氯化钠水溶液。然后使用二氯甲烷萃取，净化之后，用丙酮定容上机。通过对不同提取方法的比较，结果表明，使用乙腈提取的回收率更高，杂质干扰更小。所以本次研究采用乙腈提取法。 在净化方法上，体积比例为3:1的乙腈-甲苯直接洗脱的效果不理想，体积比例为3:2的乙腈-甲苯直接洗脱也会受到干扰。所以本次研究确定使用体积比例为3:1的乙腈-甲苯上洋，淋洗，放弃淋洗液。然后使用体积比例为3:2的乙腈-甲苯洗脱溶液，回收效果更好[4]。 3.2色谱分析条件的选择 使用Ttx-1毛细管色谱柱进行分离，效果较好。使用这种方法可以完全分离样品和腈菌唑中的杂质。根据上述实验，腈菌唑保留时间为12.4分钟，定量指标为峰面积[5]，标准色谱图如图1所示，柑橘全果的空白及添加0.1毫克标样色谱图如图2所示。 图1 标准色谱图 图2 柑橘全果的空白及添加0.1毫克标样色谱图 3.3线性范围 一般情况下，腈菌唑在蔬菜水果中的限量标准是每千克0.2-1.0毫克，所以本次研究以每千克0.1-1.0毫克作为标准曲线的范围，配制每升0.01、0.05、0.10、0.50