试验一生物化学试验课简介及试验准备（3学时）-物理与电子科学学院.DOC

生物化学实验（2011版） 范树国 编 楚雄师范学院化学与生命科学系 2013年7月 目录 实验一 生物化学实验课简介及实验准备 实验二 氨基酸的分离鉴定——纸层析法 实验三 蛋白质的性质实验（一）蛋白质及氨基酸的呈色反应 实验四 蛋白质的性质实验（二）蛋白质的等电点测定和沉淀反应 实验五 酪蛋白的制备 实验六 甲醛滴定法测定氨基氮 实验七 糖类的性质实验（一）糖类的颜色反应 实验八 糖类的性质实验（二） 糖类的还原作用 实验九 植物组织中总糖的测定－蒽酮比色法 实验十 脂肪的碱水解及化学组分鉴定 实验十一 卵磷脂的提取和鉴定 实验十二 植物DNA的提取及鉴定 实验十三 酶的特性 实验十四 过氧化氢酶活性测定（高锰酸钾标定法） 实验十五 维生素C的定量测定 实验十六 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 实验十七 根据已有知识结合实验室条件对生物材料中的四大类物质中的一类进行分析测定（一） 实验十八 根据已有知识结合实验室条件对生物材料中的四大类物质中的一类进行分析测定（二） 实验一 生物化学实验课简介及实验准备 目的：使学生掌握实验室的基本情况，对生物化学实验有一个感性的认识，掌握在实验操作中要注意的一些问题，为以后的实验做好充分准备。 内容： 一、总论 生命科学在20世纪具有惊人的发展，其中生物化学与分子生物学技术的进展尤为迅速，它极大地推动了生命科学的发展，并将成为21世纪带头学科。该学科的发展与实验技术息息相关，每一种新的生化物质的发现与研究都离不开实验技术，实验技术每一次新的发明均大大推动了生物化学研究的进展，因此，实验部分在生物化学这门学科学习中占有重要地位。它也是生物技术专业学生必修的一门基础实验课程，对于每一位生物技术专业学生来说，学习并掌握各种生物化学实验技术是极为重要的，它在生命科学基础研究领域具有广泛应用价值。 生物化学实验技术发展简史 生物科学在20世纪有惊人的发展，其中生物化学与分子生物学的进展尤为迅速，这样一门最具活力和生气的实验科学，在21世纪必将成为带头的学科，这主要有赖于生物化学与分子生物学实验技术的不断发展和完善。这里我们简单回顾一下生物化学实验技术的发展历史。 20年代：微量分析技术导致了维生素、激素和辅酶等的发现。瑞典著名的化学家T. Svedberg奠基了“超离心技术”，1924年制成了第一台5000×g（5000 r/min～8000 r/min）相对离心力的超离心机(相对离心力“RCF”的单位可表示为“×g”)，开创了生化物质离心分离的先河，并准确测定了血红蛋白等复杂蛋白质的分子量，获得了1926年的诺贝尔化学奖。 30年代：电子显微镜技术打开了微观世界，使我们能够看到细胞内的结构和生物大分子的内部结构。 40年代：层析技术大发展，两位英国科学家Martin和Synge发明了分配色谱（层析），他们获得了1952年的诺贝尔化学奖。由此，层析技术成为分离生化物质的关键技术。 “电泳技术”是由瑞典的著名科学家Tisellius所奠基，从而开创了电泳技术的新时代，他因此获得了1948年的诺贝尔化学奖。 50年代：自1935年Schoenheimer和Rittenberg首次将放射性同位素示踪用于碳水化合物及类脂物质的中间代谢的研究以后，“放射性同位素示踪技术”在50年代有了大的发展，为各种生物化学代谢过程的阐明起了决定性的作用。 60年代：各种仪器分析方法用于生物化学研究，取得了很大的发展，如HPLC技术、红外、紫外、圆二色等光谱技术、NMR核磁共振技术等。自1958年Stem，Moore和Spackman设计出氨基酸自动分析仪，大大加快了蛋白质的分析工作。1967年Edman和Begg制成了多肽氨基酸序列分析仪，到1973年Moore和Stein设计出氨基酸序列自动测定仪，又大大加快了对多肽一级结构的测定，十多年间氨基酸的自动测定工作得到了很大的发展和完善。1962年，美国科学家Watson和英国科学家Crick因为在1953年提出的DNA分子反向平行双螺旋模型而与英国科学家Wilkins分享了当年的诺贝尔生理医学奖，后者通过对DNA分子的X-射线衍射研究证实了Watson和Crick的DNA模型，他们的研究成果开创了生物科学的历史新纪元。在X-射线衍射技术方面，英国物理学家Perutz对血红蛋白的结构进行X-射线结构分析, Kendrew测定了肌红蛋白的结构，成为研究生物大分子空间立体结构的先驱，他们同获1962年诺贝尔化学奖。 此外，在60年代，层析和电泳技术又有了重大的进展，在1968—1972年Anfinsen创建了亲和层析技术，开辟了层析技术的新领域。1969年Weber应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术测定了蛋白质的分子量，使电泳技术取得了