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萝卜种子的检测

莱菔子素的检测方法 莱菔子素又称萝卜硫素,就其化学成分而言,为异硫代氰酸盐衍生物,易溶于水,相对分子质量177.3,分子式C6H11S2NO,结构式如下: 萝卜硫素是一种多功能酶诱导物,可诱导机体产生型解毒酶一谷光甘肤转移酶刀和醒还原酶,此酶能中和可疑致癌物质,防止致癌物质破坏健康细胞内的遗传因子,从而起到抗癌作用。 硝酸银沉淀法[1] 萝卜中的萝卜辣素用乙醇提取出来, 并除去大部分水溶性蛋白质和粘质等杂质,加过量的硝酸银标准溶液,生成棕黑色沉淀,剩余的硝酸银用硫氰酸铵标准溶液反滴定, 根据消耗的银量计算萝卜中萝卜辣索的含量。 此方法人为造成的误差太大,影响实验结果的准确性。 红外谱图分析[2] 在1072.19cm-1处出现了亚砜(S=O)的伸缩振动特征吸收峰,在721.74cm-1 处出现了一氯代烷(C-Cl)的伸缩振动特征吸收峰,说明产品中含亚砜和一氯代结构。 3. 质谱谱图分析[2] 4. 高效液相色谱法(HPLC) 4.1 色谱柱Shimadzu RP-18C(250×4.60mm)流动相:甲醇:水=4:6(定性分析)或2.5:7.5;流速:1ml/min;检测波长:201nm;进样量: 10μL;柱温25 ℃;分析时间:20min [3] 。 4.2 色谱柱SYNERGI MAX2RP(250 ×4.60mm) ;流速0.8 ml/min ;温度为室温;检测波长245 nm;进样量10μl;流动相A 为0. 1 %TFA水溶液,B 为0.1%TFA甲醇溶液(0~5 min 10 %B ,30~38 min 80 %B,40 min10%B)[4]。 4.3 色谱柱:Warers公司产XbridgeTM C18 (150 mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇∶水(体积比30∶70) ;流速:1.0 mL/min; 检测波长:240 nm; 进样量:10μL;柱温30℃[5]。 4.4 HPLC on a reverse-phase preparative column (Whatman; Partisil 10 ODS-2; 50 x 1.0 cm) equilibrated with methanol/water (30/70, vol/vol), 280 nm ,eluted at a rate of 3.0 ml/min, and 6.0-ml fractions were collected[6]. 高效液相色谱法的使用较普遍,结果也比较准确,是优先考虑的检测方法。 参考文献 [1].张堆勤.萝卜辣素的测定方法. 山东农业科学[J].1990,2:10-13. [2].陈根花. 萝卜硫素的合成研究.南昌大学硕士学位论文.2007. [3].苏光耀. 西兰花种子中硫昔酶解产物萝卜硫素的提取分离与结构鉴定.浙江工商大学硕士学位论文.2007. [4].夏薇,赵秀娟,吴坤,苑林宏.北方12 种蔬菜中莱菔硫烷含量的测定.疾病控制杂志[J]2005年6月第9卷第3期:209-210. [5]张婵娟,郭晓玲,孟 青,冯毅.不同品种西兰花种子中莱菔硫烷的HPLC分析. 广东药学院学报[J] 2007年10月第23卷第5期:506-508. [6]Yuesheng Zhang, Paul Talalay, Cheon-Gyu Cho, and Gary H. Posner. A major inducer of anticarcinogenic protective enzymes from broccoli: Isolation and elucidation of structure. Proc. Natl. Acad. Sci. USA Medical Sciences Vol. 89, pp. 2399-2403, March 1992

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