实验菌培养基.ppt

第十九章—药物的抗菌实验（抗生素的药效学） 常用的方法 1 连续稀释法（serial dilution test） 液体稀释法（试管法） 琼脂平板倍比稀释法 2 琼脂扩散法（agar difussion test） （1）实验药物 （2）阳性对照药物 （3）阴性对照 滤纸片法 打洞法（挖孔法） 管碟法 挖沟法 1 1 液体稀释法图解 第七节 药物制剂的微生物检查 一、微生物与药物变质 空气 含细菌、霉菌、酵母等。 除菌—过滤、化学消毒、UV照射。 水—大肠杆菌通常作为水是否被粪便污染的检验指标 人体 皮肤 与外界相通的腔道 正常菌群/条件致病菌（E.coli，绿脓，沙雷氏菌） 原材料 动物脏器 中药材—晾晒、烘烤 包装物 制药设备、厂房建筑、死角管道 人流、物流　 二、无菌制剂的无菌检查 无菌检查的基本原则 三种培养基（需氧培养基、厌氧培养基和真菌 培养基），按药典的规定程序进行。 1、一般药品的无菌检查—直接接种法 需氧菌、厌氧菌、霉菌的检查 需氧菌：30-35℃，7天 厌氧菌：30-35 ℃ ，7天 霉 菌：20-25℃，7天 观察培养液是否混浊或涂片染色镜检 阳性对照—（24 h有菌生长） 金葡CMCC（B）26003 生孢梭菌CMCC（B）64941 白色念珠菌CMCC（F）98001 2、口服药及外用药的无菌检查法 一、细菌总数的测定 二、霉菌和酵母菌总数的测定 三、控制菌的检查 口服药—不能检出大肠杆菌 脏器来源口服制剂—不能检出沙门氏菌、大肠杆菌。 外用药、眼科制剂—不能检出金葡菌、绿脓杆菌。 控制菌指的是大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌及破伤风梭菌。 四、活螨的检查 Plate Count Plate Count in theory, each isolated cell forms a single colony colony counts are taken on plates with 30 to 300 colonies Another Viable Count Method - Membrane filtration Colonies on Membrane Filters * 举 例－大肠杆菌的检查 E.coli增菌液—胆盐乳糖培养基 分解乳糖，紫黑色金属光泽菌落 形态结构—G- ，短杆菌 菌落特征 IMVIC：+ + - - 药品的微生物限度标准 Go！ 微生物在药学中的应用 微生物与制药 抗生素 氨基酸 1 食品—添加剂，调味剂L-天冬氨酰苯丙氨酸甲酸（甜味二肽）。 2 饲料—添加Lys、Met可提高饲料营养价值，鸡多产蛋，猪生长快。 维生素—以辅酶或辅基形式参与生物体各种生化代谢反应，用于防治维生素缺乏引起的各种疾病。 甾体化合物—抗炎，抗毒，抗过敏，抗休克等。治疗过敏性皮炎，类风湿关节炎，计划生育药物。 酶与酶抑制剂 α-淀粉酶 ，糖化酶，葡萄糖异构酶等； 青霉素酰化酶，门冬酰氨酶（治白血病）； 链激酶/尿激酶（去血栓）。 菌体制剂与活菌制剂 1 药用酵母—酵母（酿酒酵母） → 干燥 →? 酵母粉 2 活菌制剂（合成vitamin，维持肠道内微生态平衡） （1）乳酸菌制剂（2）双歧杆菌 主要内容 第一节 抗生素的概念和分类 第二节 抗生素的分离和筛选 第三节 抗生素的制备(自学) 第四节 抗生素的生物合成机制(自学) 第五节 抗生素的作用机制 第六节 抗生素的抗药性 第七节 抗生素含量的测定 第十九章 药物抗菌实验 第二十章 药品的微生物学质量控制 第一节 抗生素的概念和分类 抗生素(Antibiotic)：是由某些生物合成或半合成的一类次 级代谢产物或衍生物，它们在低浓度时选择性抑制或影响 它种生物的生命活动，如杀死微生物或抑制其生长。 1929年，Fleming首先从青霉菌中发现青霉素； 1940年，Florey和Chain采用溶媒萃取法获得青霉素。 1944年，Waksman在链霉菌中发现链霉素； 自本世纪40年代以来，已找到上万种新抗生素，合成了近10 万种半合成抗生素，但其中在临床上常用的仅100余种，连 同其衍生物约300余种。 Antibiotic action of soil microorganisms on a crowded plate. The smaller colonies surrounded by inhibition zones are streptomycetes. 抗生素的分类 （1）按化学结构 ?-内酰胺类—青霉素、头孢菌素等。 四环类—四环素、土霉素、金霉素。 氨基糖苷类—链霉素、卡那霉素、庆大霉素。 大环内酯类—红霉素、螺旋霉素、麦迪霉素。 多