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临床执业医师考试辅导　　　　　 医学免疫学 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 免疫学检测技术 　　大纲要求 　　一、抗体的检测及应用抗体进行的检测 　　二、免疫细胞的分离 　　三、免疫细胞的特异性、数量和功能检测 　　一、抗体的检测及应用抗体进行的检测 　　（一）概念 　　利用抗原和抗体特异性结合的特性，对抗原或抗体进行定性、定量检测。 　　（二）血凝抑制试验 　　可定量检测流感病毒中和抗体。 　　流感病毒包膜上血凝集素可凝集红细胞，血凝集素中和抗体可抑制这种凝集。 　　（三）凝集反应和血型鉴定 　　颗粒性抗原 + 相应抗体 → 凝集 　　1.直接凝集反应： 　　玻片法：抗体 → 抗原？（如：人类ABO血型鉴定；菌种鉴定） 　　定性实验 　　试管法：抗原 → 抗体？（如：肥达反应（诊断伤寒、副伤寒） 　　半定量实验 　　2.间接凝集反应： 　　将可溶性抗原/抗体吸附于载体（红细胞或乳胶颗粒）+ 相应抗体/抗原→间接凝集 　　如：将人IgG吸附在乳胶颗粒上的类风湿因子检测。 　　反向间接凝集：已知抗体吸附在载体上的凝集。如Rh血型不符时检测患者抗红细胞Rh抗原IgG。 　　（四）免疫荧光 　　 用荧光素标记的抗体/抗原分子检测相对应的抗原/抗体分子的技术。用于CD分子鉴定、细胞蛋白定位等。 　　常用荧光素：异硫氰酸荧光素（FITC）、藻红蛋白（PE） 　　（五）放射免疫 　　放射性核素标记进行的抗原抗体反应，用于激素等微量物质的检测。 　　（六） 免疫 　　1.酶联免疫吸附实验（ELISA） 　　 将抗原或抗体与固相载体（常为聚苯乙烯板）结合，然后加入待测抗体或抗原，最后以酶标抗体和底物进 检 测的技术。用于抗原或血清抗体的定量检测。 　　2.免疫组化：用标记特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和 - 底物的显色反应，对细胞中的抗原进 定位、定性检测的方法。 　　（七）免疫电镜 　　免疫化学技术与电镜技术结合，在超微结构水平观察抗原、抗体结合定位的方法。 　　（八）免疫沉淀 　　用特异性抗体自细胞裂解液中分离特异性蛋白抗原的方法。 口腔视界，精心制作（微信号：dental6） 　　　　　　 第1页 临床执业医师考试辅导　　　　　 医学免疫学 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　（九）免疫印迹：Western blotting 　　用抗体检测蛋白质的分子量和抗原特异性的方法。 　　 　　免疫印迹 　　二、免疫细胞的分离 　　（一）Ficoll-hypaque离心法： 　　即葡聚糖-泛影葡胺密度梯度离心法。常用于分离制备单个核细胞（PBMC）。 　　 　　（二）磁珠分离法：利用免疫磁珠对淋巴细胞及其亚群进行分离纯化。如抗CD4磁珠 　　 （三）流式细胞术（FCM）：用荧光激活细胞分类仪通过荧光素标记单克隆抗体结合细胞表面CD分子而对细胞进 行分类和定量的检测方法。 口腔视界，精心制作（微信号：dental6） 　　　　　　 第2页 临床执业医师考试辅导　　　　　 医学免疫学 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　 　　 　　流式细胞术可用于鉴定、分离不同细胞。 　　三、免疫细胞的特异性、数量和功能检测 　　（一）流式细胞术： 　　 （二）T细胞增殖试验：观察在有丝分裂原（PHA、ConA）或特异性抗原刺激下T细胞的增殖反应，测定细胞免疫功 能。 3 　　1. H-TdR掺入法：液体闪烁仪检测 　　2.MTT比色法：操作简便，无放射性污染。 51 　　（三）细胞毒试验：检测CTL、NK细胞杀伤靶细胞活性的细胞学技术。如Cr 释放法。 口腔视界，精心制作（微信号：dental6） 　　　　　　 第3页 临床执业医师考试辅导　　　　　 医学免疫学 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　 　　（四）细胞凋亡检测： 　　1.琼脂糖凝胶电脉法：呈现梯状DNA区带图谱 　　2.FACS法：出现亚二倍体峰 　　3.TUNEL法：可以荧光定位显示凋亡细胞 　　（五）芯片