甘草RAPD-PCR反应体系正交优化研究.pdfVIP

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2017-08-09 发布于浙江
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甘草RAPD-PCR反应体系正交优化研究.pdf

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甘草RAPD-PCR反应体系正交优化研究

AgriculturalScience＆Technology，2011，12(10)：1427—1429 Copyright⑥2011，InformationInstituteofHAAS．Allrightsreserved AgriculturalBiotechnology Optimization of RAPD--PCR Reaction System for GlycyrrhizauralensisBasedonOrthogonalDesign ZHANG Zeng-fu’ DONG Jian-li ，LIMing。， 1．AgriculturalTechnology~ExtensionServiceStationofNingxia，Yinchuan750001；2．AgriculturalBio—TechnologyResearchCenterofNingxia AcademyofAgricultureandForestrySciences，Yinchuan 750002；3．InstituteforDese~ Reseamh，NingxiaAcademy ofAgricuRureand Forestry Sciences，Yinchuan750002 Abstrect 『0bjective]TheaimwastoobtaintheoptimumRAPD—PCRreactionsystem forGlycyrrhizauralensis． M『ethod]0dhogonaldesign wasadoptedtoscreenthesuitableconcentrationoffourmajorfactors(dNTPs．primers．TaqpolymeraseandDNAtemplate)inPCRreaction system． R『esultlTheoptimalreactionsystemobtainedbyodhogonaldesignwas25ulintotaIvolume。containing2．5plof10×PCRbuffersolu- tion(includeMgCI2)，2．5 of10mmol／LdNTPs，2pl(100ng)ofDNAtemplate，2plof10pmol／Lprimers，0．4pl(5U)ofTaqpolymerase； theoptimumannealingtemperaturewas34℃．fCoRdIlsJon]0rthogonaldeignwasaneffectivemethodfortheoptimizationofRAPD-PCRreac- tionsystem forG．uralensis． Keywords Glycyrrhizauralensis；DNA；RAPD-PCR；Reactionsystem ；Optimization；Orthogonaldesign Glycyrrhizauralensis．a shrub-likeperennialherbofGy／- PCR reactionsystem forG．uralensiswasestablishedand it cyrrhizainPap川iOnOideae．isoneofthemostcommonmedic— willprovidethescientificbasisformolecularbiologyaboutG． inaIherbsinC．hinaandhasbeenusedfora Iongtime．1tis uralensisresourcesfr0m differentregions． mainly grown in CentraIAsia．North America and Eastern Europe．especiallyaroundtheCentralAsiaandtheMediterra- MaterialsandMethods neancoastaIareas．A totaIof17—18Glycyrrhizaspeciesand Materials threevariantshavebeenfound InChina．concentratedinthe 17Glycyrrhizaspeci