蒽醌苷类.PPT

酸催化水解反应难易的规律 4.去氧糖苷较非去氧糖苷易酸水解。因为-NH2或OH可与苷键原子争夺质子 5.平面结构的呋喃环较吡喃环易于被酸解改善拥挤状态而减少环张力，故易水解。 6.C5-R的位阻越大越难水解：七碳糖＞六碳糖＞甲基五碳糖＞五碳糖 单糖、低聚糖的提取 水、50或80%乙醇水，70-80℃提取 （或脱脂后进行） 溶剂量：低倍量（花、茎叶类药材） 高倍量（根/根茎类药材以防不易过滤） 单糖、低聚糖的分离、纯化 去蛋白质、粘液质等（如脂肪、多糖） ——中性醋酸铅去蛋白，石灰水去粘液质 醇溶解→活性炭脱色→浓缩→冷却→滴加乙醚→结晶 或用吸附色谱法、离子交换法纯化 多糖的提取与分离 脱脂预处理——醇、醚 提取溶剂：水、酸水、碱水（5h/次，3次） 酸提时间宜短，温度宜低（≤5℃） 多糖的提取与分离 纯化与分离 乙醇沉淀法（最常用） 分级沉淀法 季铵碱盐沉淀法 金属离子络合法 盐析法 离子交换色谱法 纤维素柱色谱法 凝胶柱色谱法 超滤法 多糖的分离 乙醇沉淀法：水溶液中加3-5倍量95%乙醇，静置过夜，收集沉淀，可反复多次 分级沉淀：30、50、70%（以95%乙醇调节）——？如何用95%乙醇沉淀 凝胶柱色谱：sephadex G, sepharose, sephacryl——按分子量大小分离 G-25/50：去无机盐及小分子 G-150/200：分离多糖 超滤法：膜分离技术 以膜两侧的压力为推动力，将不同分子量的物质进行选择性分离 分子筛原理+荷电性与膜作用 分离范围：500-1000000分子量 P116举例 * * * * * * 2008-6-4 * 酶催化水解 酶是活性高，专属性强的生物催化剂，其割裂苷键的条件比较温和，苷元不发生结构变化，且又能获得有关苷键构型情况 转化糖酶(invertase)→水解β-果糖苷键； 麦芽糖酶(maltase)→水解α-D-葡萄糖苷键 杏仁苷酶(emulsin)→水解β-六碳醛糖苷键 纤维素酶(cellulase) →水解β-D-葡萄糖苷键 2008-6-4 * 少数酶的立体选择性非常强，只能水解某个化合物的某个糖。 　　　　　 Ｋ－毒毛旋花子苷　β－Ｄ葡萄糖苷酶　　Ｋ－毒毛旋花子次苷 Ｋ－毒毛旋花子苷　　毒毛旋花子双糖酶　　　加拿大麻苷　 　 * 过碘酸裂解反应 （SMITH裂解法） 是过碘酸氧化反应经改进，用于割裂具有1，2-二元醇糖苷键的温和反应。 　对苷元结构容易改变的苷以及C-苷的水解特别适宜。而不适宜苷元上也具有1，2-二元醇结构的苷类。 　特点：应条件温和，易得到原苷元。 该反应在水解产物中得不到完整的糖分子。 P96例：人参皂苷Rb1 * 反应的基本方法: 　试剂：NaIO4　， NaBH4 2008-6-4 * 应用于碳苷的情况: 2008-6-4 * 第六节 糖链的结构测定Structural Elucidation of Saccharide Chain 研究糖链结构的一般程序 2008-6-4 * ●纯度鉴定 ▲多糖的纯度鉴定： 比旋度法(两次沉淀比旋度相同)； 高压电泳法（与硼酸络合后电流以增加多糖导电性或移动速率，醋酸薄膜支持，显色剂多为P-茴香胺硫酸试剂）。 ▲糖的衍生物苷的纯度鉴定：MP、TLC、HPLC。 2008-6-4 * ●多糖的分子量测定： 多采用FD-MS、FAB-MS，电喷雾质谱（ESI-MS）等。 电喷雾质谱（ESI-MS，大/小分子均可） 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS，新型） 经典法：粘度法、沉降法等，甚至仅仅测定标示其平均分子量。 2008-6-4 * ●单糖的鉴定 为了鉴定低聚糖、苷类乃至多糖分子中的单糖种类及其比例，通常是将其苷键全部水解（乙酰解），然后经TLC、PC、GC或HPLC检出。 P105 * ●单糖的NMR分析 H-2~H-5: ?3.2-4.2， 多重叠 端基H: ?4.3-5.5 CH2OH： ?3.6-3.9 CH3： ?1.3 区别端基C ?-D-glc ： ?97.4（氢4.64） ?-D-gal： ?98.0（氢4.53） ?-D-甘露糖： ?95.2(氢4.89) * ●单糖间、糖与苷元间连接位置的确定 通常：甲基化→水解 游离羟基处即为糖的连接位点，全甲基化的糖 即为末端糖。P106结构图 另1H-NMR：乙酰化低聚糖或苷，CHOAc中CH质子?4.75-5.4，非