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摘要
摘 要
目的:
观察雌激素对不同阶段成骨细胞中caveolin-1(小凹蛋白一1)表达的影响,
并研究caveolin一1在雌激素调节成骨细胞分化成熟过程中的作用。
方法:
将雌激素分别作用于增殖期(第2天)、分化期(第6天)、矿化期(第12
天)的成骨细胞(MC3T3一E1)48小时,采用western
一1蛋白表达变化。对于分化期MC3T3-E1细胞,采用caveolin-1真核表达质粒
Pcl—neo—cav一1上调caveolin-1表达后,观察其对雌激素调节成骨细胞代谢作
用的影响,观察指标分别为细胞裂解液ALP活性(PNPP法)、培养上清骨钙素浓
后,通过检测细胞培养基一氧化氮水平,探索caveolin一1作用机制。
结果:
增殖期、矿化期细胞无明显影响。
2.雌激素可升高分化期MC3T3-E1细胞ALP的活性、培养基骨钙素浓度,
上调cbfa-lmRNA表达。转染caveol
述雌激素作用(PO.01)。各处理组中一氧化氮浓度无明显改变。
结论:
该作用不涉及一氧化氮途径。
关键词:MC3T3-E1;Caveolin-1;成骨细胞;雌激素;分化期
II
Abstract
ABSTRACT
objective:
To theeffectof onthe ofcaveolin-1in
investigate estrogenexpression protein
osteoblasticMC3T3一E1.To theroleofcaveolin一1 onthe of
study playingregulation
ondifferentiationofMC3T3-E1.
estrogen
Methods:
toMC3T3-E1at phase(2nd
Addingestrogen proliferative
mineralizational2th observethe
d),and phase(1d)for48h,to expression
phase(6th
viaWestern
ofcaveolin-1
changes protein Blotting.
andcaveolin--1 Pcl··neo-·cav·-1were
Estrogen eukaryoticexpressionplasmid
at mRNA of
inMC3T3一E1cellthedifferentiationthe
applied phase,and expression
osteoblastic factor incell
cbfa-1(RT-PCR),ALPactivitylysis
specifictranscriptional
mediumwere
investigated.
(PNPP)andosteocalcin(OCN)concentration(ELISA)in
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