纳米金棒诱导a549细胞产生自噬的机制研究研究.pdfVIP

第３６卷 第３期 电 子 显 微 学 报 Ｖｏｌ.３６，Ｎｏ.３ ２０１７年６月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｅｌｅｃｔｒｏｎ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ Ｓｏｃｉｅｔｙ ２０１７-０６ 文章编号：１０００-６２８１（２０１７）０３-０２７９-０７ 纳米金棒诱导 Ａ５４９细胞产生自噬的机制研究 ＃ ＃ ∗ 吕园园 ，王飞飞 ，汤 莹，沈亚峰，范晓燕，袁青宁，雷长海，杨勇骥 （第二军医大学基础医学部，生物物理学教研室，上海２００４３３） 摘 要 纳米金棒（ＡｕＮＲｓ）具有众多独特的属性，已广泛运用于生物医学领域，但其是否具有潜在的生物危害 尚有争议。 作者运用了激光扫描共聚焦显微镜技术、ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ技术和其他分子生物学方法从细胞氧化应激 －１ 的角度探讨了ＡｕＮＲｓ诱导Ａ５４９ 细胞产生自噬的分子机制。 研究结果表明，４ μｇ·ｍＬ 的ＡｕＮＲｓ 处理６ ｈ 能够诱 导Ａ５４９ 细胞自噬标志蛋白ＬＣ３-ＩＩ表达增加，ＬＣ３蛋白从细胞核转移至细胞质并形成自噬小泡。 进一步研究发现， ＡｕＮＲｓ能够降低Ａ５４９ 细胞线粒体膜电位、ＡＴＰ含量、ＵＣＰ２蛋白表达水平以及细胞抗氧化能力并导致活性氧蓄积， －１ 后者可能最终引起细胞产生自噬。 而１０ ｍｍｏｌ·Ｌ 抗氧化剂ＮＡＣ能够逆转上述线粒体及细胞功能的改变，并抑制 自噬的发生。 这一研究为深入认识其生物危害及可能机制提供了有力的实验证据。 关键词 纳米金棒；自噬；氧化应激；ＲＯＳ；ＬＣ３；线粒体 中图分类号：Ｑ６８９；Ｑ２５６；Ｑ３３６ 文献标识码：Ａ ｄｏｉ：１０.３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１０００-６２８１.２０１７.０３.０１３ 由于纳米金棒（ｇｏｌｄ ｎａｎｏｒｏｄｓ，ＡｕＮＲｓ）在其颗 诱导的自噬可能是其导致细胞毒性的重要机制。 有 粒大小、稳定性、生物相容性、光学特性和表面易修 研究发现，纳米颗粒引起的细胞毒性可能是由活性 饰性等方面具有一些独特的属性，因此被认为是最 氧族（ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯＳ）所引起的。 ＲＯＳ ［１］ 具前景的纳米材料之一 。 目前，ＡｕＮＲｓ 已广泛运 是一类短寿命、高反应性的小分子，通常由氧的不完 ［５］ 用于生物医学领域，如细胞和动物活体成像、药物和 全单电子还原所形成 。 细胞中ＲＯＳ 主要有两个 ［２］ 基因传递以及多种疾病的诊断和治疗等 。 然而， 来源：线粒体和ＮＡＤＰＨ氧化酶。 研究发现，线粒体 研究发现ＡｕＮＲｓ在广泛运用的同时可能对生物机 是调节自噬的ＲＯＳ 主要来源，线粒体产生的ＲＯＳ ［６］ 体产生一定的潜在危害。 本实验室及他人的研究发 是氧化应激诱导自噬所必需的分子 。 ＲＯＳ 的蓄 现，ＡｕＮＲｓ对人肺腺癌细胞（Ａ５４９ 细胞）具有一定 积可以导致氧化应激，进而加剧细胞成分如蛋白质、 的细胞毒性且呈