氧化胁迫对毛白杨叶肉细胞结构和生理功能的影响研究.pdfVIP

第３６卷 第３期 电 子 显 微 学 报 Ｖｏｌ.３６，Ｎｏ.３ ２０１７年６月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｅｌｅｃｔｒｏｎ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ Ｓｏｃｉｅｔｙ ２０１７-０６ 文章编号：１０００-６２８１（２０１７）０３-０２８６-０７ 氧化胁迫对毛白杨叶肉细胞结构和生理功能的影响 孟繁婷，李嘉鑫，李 慧，刘 頔，陆 海∗ （北京林业大学生物科学与技术学院，林木育种国家工程实验室，林木、花卉遗传育种教育部重点实验室， 国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室，北京 １０００８３） 摘 要 为了研究氧化胁迫条件下，毛白杨植株细胞结构和生理生化的变化特征，从而为木本植物应对氧化胁 迫的研究提供实验依据。 本研究以毛白杨组培植株为实验材料，利用过氧化氢溶液浸泡处理离体叶片进行氧化胁 迫，测量氧化胁迫前后各项生理指标的变化并观察细胞结构形态的变化。 结果表明氧化胁迫后，毛白杨植株内过 ＋ 氧化氢含量明显升高；伴随着ＮＡＤＰ ／ ＮＡＤＰＨ 比值的显著升高，抗坏血酸的含量明显下降；同时丙二醛含量明显 升高；ＡＤＰ／ ＡＴＰ 比值明显下降；蛋白羰基化程度随过氧化氢含量的升高而增强；叶肉细胞及叶绿体结构发生改变， 叶绿体双层膜结构不清晰，类囊体片层结构解体。 结论：毛白杨受到氧化胁迫后体内活性氧含量迅速升高，造成膜 脂、蛋白质及细胞结构受到不同程度的氧化损伤。 关键词 毛白杨；氧化胁迫；过氧化氢；叶肉细胞结构；生理生化指标 中图分类号：Ｓ７９２.１１７；Ｓ７１８.４３；Ｑ３３６ 文献标识码：Ａ ｄｏｉ：１０.３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１０００-６２８１.２０１７.０３.０１４ 氧化胁迫是生物体在受到外源刺激（如温度、 化胁迫对毛白杨生长和生理的影响，以期为木本植 辐射和氧化剂等）后，引起体内活性氧（如过氧化 物应对氧化胁迫的研究提供实验依据。 氢、超氧自由基以及羟基自由基等）的大量产生，当 １ 材料与方法 活性氧的产生速度超过机体抗氧化系统的清除能力 ［１］ 时，对细胞产生毒害作用 。 １.１ 实验材料 氧化胁迫对植物的毒害作用主要体现在破坏生 野生型毛白杨组培植株由实验室保存。 植株生 物膜系统，活性氧能引起生物膜磷脂中不饱和脂肪 长条件为２５ ℃，每天光照１６ ｈ。 酸链的分解，造成膜结构的破坏，膜透性增大，离子 １.２ 实验处理 外渗，色素破坏，导致体内代谢失调；破坏蛋白质结 选取长势良好、生长状态相似的野生型毛白杨 构，肽链断裂或交联，电荷变化，造成蛋白质原本功 组培植株，取植株中上部叶片，用去离子水冲洗干 能丧失，免疫化学性质变化；破坏生理活性物质，活 净，剪成０.５ ｃｍ×０.５ ｃｍ小块。 室温避光条件下， －１ －１ 性氧可引起酶失活，破坏代谢途径；能使植物生长素 将叶片完全浸入５０ ｍｍｏｌ·Ｌ 和１００ ｍｍｏｌ·Ｌ 过氧 ＋ 化氢溶液处理３ ｈ，液氮速冻后保存于－８０ ℃冰箱 ＩＡＡ分解；能破坏生化反应中的重要辅酶 ＮＡＤ 和 ＋ 备用。 ＮＡＤＰ 及光合作用的色素系统等，最终导致植物的 ［２］ 死亡 。