前列康泰方对慢性细菌性前列腺炎前列腺组织中细胞因子影响.docVIP

前列康泰方对慢性细菌性前列腺炎前列腺组织中细胞因子影响【摘 要】 目的:慢性前列腺炎是男性泌尿系统常见的疾病，中药前列康泰方是治疗慢性前列腺炎的经验方，为了探讨其作用机理，本实验研究前列康泰方对慢性细菌性前列腺炎大鼠前列腺组织中细胞因子TNF-α、IL-1β含量的影响，并观察前列腺组织形态学改变。方法:利用大鼠前列腺侧叶注入大肠杆菌混悬液来建立慢性细菌性前列腺炎(CBP)病理模型，经前列康泰方治疗35天后，观察大鼠前列腺组织病理学改变并测定前列腺组织中细胞因子TNF-α、IL-1β的含量。结果：前列康泰方能改善慢性细菌性前列腺炎大鼠前列腺组织病理学改变；可降低前列腺组织中细胞因子TNF-α、IL-1β的含量。结论：前列康泰方对慢性细菌性前列腺炎有明显的治疗作用，其作用机制可能与降低前列腺组织中细胞因子TNF-α、IL-1β水平有关。 【关键词】前列康泰方; 慢性细菌性前列腺炎; 细胞因子TNF-α、IL-1β 近年来，慢性前列腺炎呈迅速增多的趋势,虽然它不会对患者的生命构成威胁,但可严重影响患者的生活质量。中医药治疗慢性前列腺炎具有较好的疗效，我们通过临床观察，发现慢性前列腺炎具有“肝实肾虚”的病机特点，进而在“泻肝补肾，攻补兼施”的治疗原则下组成了治疗慢性前列腺炎的经验方――前列康泰方（主要由蒲公英、败酱草、土茯苓、丹参、红花、黄芪等组成）。该方具有清热解毒、利湿化浊、活血化瘀、补肾益气之功效。为了探讨其治疗作用，进而说明其作用机理，本实验通过建立慢性细菌性前列腺炎的动物模型并对前列康泰方进行相关实验研究。 1 材料 1.1 动 物 3月龄雄性Wistar大鼠40只，体重180~220g，由湖北省疾病控制中心提供。 1.2 主要药物和试剂 （1）标准大肠杆菌E.coli噬菌体（由中国医学科学院武汉病毒研究所提供），临用时进行细菌培养，配成大肠杆菌浓度为107~109个/ml的混悬液。 （2）盐酸左氧氟沙星胶囊（浙江医药有限公司生产，产品批号061107），临用时配成0.4%溶液。 （3）前列康泰方水煎液，由蒲公英、败酱草、土茯苓、丹参、红花、黄芪等组成，临用时水煎，最后浓缩为每1ml含生药2.26g的水煎液。 1.3 主要仪器 TGL－16G－A型离心机（上海安亭科学仪器厂生产），JD200-3型电子天平(沈阳龙腾电子称量仪器有限公司生产)。 2 方法 2.1 造 模 取30只大鼠饲养一周，以让动物适应实验室环境，一周后再正式开始制造慢性细菌性前列腺炎模型。每只大鼠均按40mg/kg腹腔注射戊巴比妥钠麻醉，无菌条件下切开下腹部皮肤和肌层，用镊子提起膀胱及两侧精囊，暴露前列腺背叶；于前列腺两侧叶注入预先稀释好的浓度为107~109个/ml大肠杆菌混悬液0.2ml，最后缝合腹壁肌层和皮肤，用消毒纱布包扎，放回鼠笼，自由饮食[1-2]。每只大鼠每天用碘酒消毒手术伤口2次，防止术后感染。 2.2 实验分组 实验共分4组，将已做手术的30只大鼠随机分为慢性细菌性前列腺炎模型组、左氧氟沙星阳性对照组和前列康泰方治疗组，每组10只；另取10只正常Wistar大鼠，做为正常对照组。 2.3 给药 各组大鼠自由饮食，造模7天后开始给药。正常对照组与慢性细菌性前列腺炎模型组大鼠灌胃生理盐水；左氧氟沙星组灌胃0.4%的左氧氟沙星溶液；前列康泰方治疗组灌胃前列康泰方水煎液（含生药2.26g/ml）。各组大鼠分别给予相应药物，每次每只均按5ml/Kg灌胃，每天灌胃2次，连续5周。 3 检测指标 3.1 观察前列腺组织形态学改变 连续给药5周后开始检测指标。各实验组大鼠眼球取血后,迅速打开每只大鼠腹部，找到前列腺，剪取部分前列腺侧叶组织，以10%多聚甲醛溶液固定，包埋切片，HE染色，供光镜下观察前列腺组织形态。 3.2 检测大鼠前列腺组织中细胞因子TNF-α、IL-1β的含量 另取部分前列腺侧叶组织，按每100mg前列腺组织加冷生理盐水1ml，剪碎组织块并倒入匀浆器中，制备组织匀浆(其中匀浆器下端浸入冰水中)；随后将组织匀浆以3000r/min离心15min，取适量上清液，按照ELISA试剂盒(深圳晶美生物有限公司)说明书的方法分别检测TNF-α、IL-1β的含量。 4 结果 4．1 光镜结果 光镜下可见正常组前列腺腺泡上皮呈单层立方或柱状排列，腺腔较大，结构完整，中心无皱褶，腺腔内可见红染蛋白性物质，间质较少，无纤维细胞增生。模型组前列腺组织腺腔及间隙中有炎性细胞渗出，间质增宽、水肿，有纤维细胞增生和血管增生，腺腔结构不完整，腺细胞分泌功能降低，病理损害明显。左氧氟沙星组腺腔结构完整，腺腔及间隙炎