塔拉豆粉食用安全性评价探究.doc

塔拉豆粉食用安全性评价探究摘要：目的：评价云南引进的珍贵树种――塔拉豆粉的食用安全性，为新资源食品开发提供基础数据。方法：按GBl5193―1994《食品安全性毒理学评价程序和方法》进行，包括：急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓微核试验、小鼠精子畸形试验、30d喂养试验和传统致畸试验。结果：雌雄大、小鼠急性经口LD5010g/kg.bw，属无毒级。Ames试验、小鼠骨髓微核试验和精子畸形三项遗传毒性试验结果均为阴性，30d喂养试验未显示明显毒性，传统致畸结果阴性。结论：塔拉豆粉经食品毒理学安全性评价认为是安全的，可将其运用于保健食品的开发研究中。 关键词：塔拉豆粉；安全性；毒理学 中图分类号：R965.3 文献标识码：A 文章编号：1007―2349(2008)05―0047―03 塔拉主要生长于南美洲西北部，盛产于秘鲁，当地称塔拉(Tara)。塔拉又名刺云实(Caesalp inia sp inosa Kunt ie)是我国首次从南美洲引进并栽培成功的珍贵经济树种，现引种栽培地点分布在云南省，栽培面积已达266余hm。引种塔拉的干燥荚果的果皮(荚壳)，除可制取没食子酸，具有较高的经济价值外，还可供药用，其功效成分包括：清热解毒、抗菌消炎、清肺止咳、祛痰平喘，可用于治疗急慢性咽炎、扁桃体炎、上呼吸道感染引起的咳喘等，疗效确切，有很好的开发利用价值。为了进一步探索将其开发利用于保健食品，本项目对塔拉豆粉的安全性进行了系统毒理学评价。 1、材料与方法 1.1材料　塔拉豆粉，淡黄色的粉末，由昆明医学院重点实验室提供。中国科学院昆明动物研究所实验动物开发中心提供昆明系健康成年小白鼠，批准号：云动管字SD大鼠来源于云南省天然药物药理重点实验室，动物质量合格证号：菌株：选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门菌，共4株，即TA97a、TA98、TA100、TA102，经生物学鉴定合格；实验仪器：电子天平，全自动血液分析仪，全自动生化分析仪，显微镜，恒温水浴箱。 1.2方法 1.2.1急性毒性试验　昆明种小白鼠及SD大鼠各20只，随机分成2组，雌雄各半，取样品配成最高剂量10g/kgbw，采用1次最大剂量灌胃法，经口灌胃。 1.2.2骨髓微核试验　昆明种小白鼠50只，随机分成5组，每组10只，雌雄各半，设阴性对照组、阳性对照组(环磷酰胺35mg/kgbw腹腔注射)及3个剂量组，受试剂量分别为1.87g，3.75g，7.50g/kgBW，间隔24h灌胃2次，末次给药后24h颈椎脱位处死，取出股骨，常规制骨髓涂片，用Giemsa染色镜检。 1.2.3精子畸形试验　试验动物分为5组；阴性对照组，环磷酰胺阳性对照组。塔拉豆粉低，中，高剂量组，每组有效动物不低于5只。剂量为1.25g，2.50g，5.00g/kgbW，每天清晨空腹灌胃，连续灌胃5d，于首次给受试物起，喂养35d。喂养结束后颈椎脱臼处死小鼠，取双侧副睾中精子涂片，染色后镜检精子细胞数，计数畸形细胞数并分类，结果用γ2检验进行比较。 1.2.4 Ames试验　设5000、1000、200、40μg/皿4个剂量组，采用掺入法，加S9或不加S9进行试验。 1.2.5 30d喂养试验　SD断乳大鼠80只，随机分成4组，每组20只，雌雄各半，设1个阴性对照组及3个试验剂量组(2.5、5.0、10.0g/kg)，连续喂养30d。所有动物每7d称重1次。试验结束，取血检测各项生化指标，取肝、肾、睾丸组织作病理学检查。 1.2.6传统致畸试验　SD纯系健康成年大鼠120只。未交配过的雌性大鼠80只，雄性40只。大鼠按1：1同笼后，于次日晨阴道涂片，确定受孕大鼠及受孕日期，随机分配至4个受试组。于受孕后第7～16d，自由进食各组配方粉状饲料，定期称体重。第20d乙醚麻醉处死，剖腹取出子宫称重，检查胚胎着床数、吸收胎、早死胎、迟死胎及活胎数，对存活胎鼠进行外观畸形，性别检查。测量每只活胎鼠的体重，身长及胎盘重，并将每窝活胎鼠1/2制作骨骼标本及骨骼检查，另1/2固定后进行内脏检查。 1.2.7数据分析与处理　试验结果均采用SPSS软件进行检验。 2、结果 2.1急性毒性试验　大、小鼠动物试验期间无死亡，LD5010g/kgbw。按急性毒性分级标准评价，属无毒级。 2.2骨髓微核试验阳性对照组与阴性对照组比较，差异有高度显著性(P0.05)，试验结果为阴性，即在所测试水平，样品对昆明种小鼠没有精子致畸作用。见表1。 价值外，有必要对其进行深入的药物及食物的开发研究。本项目的研究首次报道塔拉豆粉的安全性。按GBl5193―94《食品安全性毒理学评价程序和方法》对塔