复方补骨脂颗粒中芍药苷测定及其初步稳定性探究.doc

复方补骨脂颗粒中芍药苷测定及其初步稳定性探究[摘要]目的：在复方补骨脂颗粒芍药苷的方法学研究基础上，对其初步稳定性进行了考察，以确定复方补骨脂颗粒的有效期。方法：采用高效液相法测定芍药苷的含量变化，进行室温留样观察，考察复方补骨脂颗粒的各项指标。结果：芍药苷方法学研究简单、可行，测定芍药苷方法精密度RSD=1.1%（n=5），并且复方补骨脂颗粒在常温下质量稳定。结论：采用留样观察法预测有效期，结果较准确。 [关键词]复方补骨脂颗粒;芍药苷;初步稳定性 [中图分类号]R927 [文献标识码]B[文章编号]1673-7210（2007）05（c）-091-02 复方补骨脂颗粒由补骨脂、赤芍、续断、锁阳、狗脊、黄精等六味药组成，具有温补肝肾，强壮筋骨，活血止痛的功效。用于肾阳虚亏、腰膝酸痛、腰肌劳损及腰椎退行性病变等。复方补骨脂颗粒收载于部颁标准中药成方制剂第四册，标准号为WS3-B-0779-91。为更好地保证该制剂质量，笔者以芍药苷为指标，对其初步稳定性进行了研究。 1 材料与方法 1.1 仪器和试药 HP-1100高效液相色谱仪（美国惠普）；芍药苷对照品[中国药品生物制品检定所，批号(0736-200219）]，甲醇（色谱纯），二次蒸馏水，复方补骨脂颗粒（自制），其他试剂均为分析纯。 1.2 方法 1.2.1 芍药苷含量测定方法学考察 1.2.1.1 高效液相色谱条件［1］：色谱柱：Hypersil C18(5 μm,ID4.6 mm×250 mm，大连依利特科学仪器有限公司)；流动相：甲醇-水（23∶73）；流速：1.0 ml/min；柱温30℃；检测波长230 nm。 1.2.1.2 溶液的制备：芍药苷对照品的制备：精密称取减压干燥至恒重的芍药苷对照品适量，用80%甲醇溶解配制的浓度为0.1484 mg/ml的溶液，作为对照品溶液。 样品供试品的制备：取装量差异项下的内容物，混匀、研细，取约0.1 g，精密称定，置50 ml量瓶中，加入80％甲醇约40 ml，超声处理20 min，加80％甲醇至刻度，摇匀，用0.45 μm滤膜滤过，即得。 芍药苷阴性对照液的制备：取不含白芍的群药，按制备工艺制备阴性对照样品。取阴性对照样品适量，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照液。 1.2.2 系统适应性试验分别取芍药苷对照品溶液、供试品溶液、缺白芍阴性供试品溶液注入液相色谱仪，芍药苷的保留时间（tR）约为11 min。本试验条件下，供试品溶液芍药苷峰与其他成分能达到基线分离，阴性供试品溶液在芍药苷出峰处无干扰。理论塔板数以芍药苷峰计，应不低于5 000。 2 结果 2.1 线性关系 分别精密吸取“芍药苷对照品纯度检查”项下的对照品溶液0.5、1、2、3、4、5 μl，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定芍药苷峰面积。以芍药苷峰面积积分值为纵坐标（Y），芍药苷含量为横坐标（X），得回归方程： Y=1354.10734X+0.25894，r=0.99995，芍药苷在 0.07405-0.7405 μg范围内线性关系良好。 2.2 芍药苷对照品纯度检查 精密称取减压干燥至恒重的芍药苷对照品适量，用80%甲醇溶解配制得浓度为0.1484 mg/ml的溶液，作为对照品溶液。精密吸取该对照品溶液及配制对照品溶液的溶剂各15 μl，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，用峰面积归一化计算芍药苷纯度为99.8%。 2.3 精密度试验 精密吸取芍药苷对照品溶液（0.4341 mg/ml），重复进样5次，每次5 μl，测定芍药苷峰面积，其RSD=0.7%。 2.4 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液5 μl，每隔2 h测定芍药苷峰面积。供试品溶液中芍药苷在8 h内稳定性良好。 2.5 重现性试验 精密称取胶囊内容物0.1 g，按供试品溶液的制备方法平行制备5份供试品溶液，同等色谱条件测定芍药苷峰面积，平均含量37.76 mg/g，RSD=1.1%。 2.6 加样回收率试验［2］ 取已测定含量的胶囊内容物（平均含量37.76 mg/g），取约0.05 g，精密称定，分别加入芍药苷对照品适量，按供试品溶液的制备方法制备5份供试液，分别进样，测定芍药苷峰面积，计算为芍药苷的平均回收率为100.7%，RSD=2.1%。 2.7 样品测定 按供试品溶液的制备方法分别制备供试液，同法测定，外标法计算芍药苷含量，测定出复方补骨脂颗粒中芍药苷的含量为16.87 mg/g。 2.8 初步稳定性试验 2.8.1 样品包装及考察环境复方补骨脂颗粒样品以临床试验用包装（在包装材料质地与结构上相当于上市药品的