白三烯制剂对大鼠急性肺损伤干预作用.docVIP

白三烯制剂对大鼠急性肺损伤干预作用[摘要]目的：探讨白三烯抑制剂齐留通对博莱霉素（BLM）所致肺损伤的保护作用。方法：采用气管内滴注博来霉素致大鼠急性肺损伤模型，并给予齐留通胃管内灌注进行干预，另设生理盐水(NS)对照组。观察大鼠肺系数的改变、肺组织病理学检查及评分以及肺组织免疫组化转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达水平。结果：齐留通干预组的肺系数、急性肺损伤程度以及TGF-β1在肺组织中的表达水平均显著低于模型组。结论：齐留通可减轻博莱霉素诱导的大鼠肺损伤程度，并可能通过调节全身炎症反应综合征与代偿性抗炎症反应综合征之间平衡的方式而实现对急性肺损伤的保护。 [关键词]白三烯；急性肺损伤；TGF-β1；博莱霉素 [中图分类号]R361 [文献标识码]B[文章编号]1673-7210（2007）07（a）-127-02 急性肺损伤(acute lung injury，ALI) 是临床常见的危重病症，其发病机制尚未完全清楚，目前尚缺乏有效的治疗措施。目前普遍认为，肺内过度的、失控的炎症介质的释放反应是各种病因所致ALI的根本原因[2]，因而ALI被认为与全身炎症反应综合征(SIRS)关系极为密切。白三烯（leukotrienes，LTs）是花生四烯酸通过5-脂氧合酶(5-LO)代谢途径产生的代谢产物。研究表明，LTs作为一种重要的前炎症介质，在许多炎性疾病发病机制中的重要作用已被逐渐认识，但其在ALI发病过程中的作用尚不清楚。本研究用博来霉素建立大鼠急性肺损伤模型，观察白三烯抑制剂齐留通对ALI的作用，为临床防治肺纤维化探索新措施。 1 材料与方法 1.1 材料 SD大鼠由中南大学实验动物学部提供。白三烯抑制剂齐留通由北京高盟化工有限公司提供原粉。BLMA5由哈尔滨博莱制药有限公司提供。转化生长因子β1(TGF-β1)抗体、链霉素亲和素-过氧化物酶复合物(SABC)免疫组化试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。 1.2 模型的建立、分组与标本处理 18只SD雄性大鼠（200±20） g随机分为正常对照组（C组）、模型对照组（M组）和齐留通治疗组（T组）三组，每组6只。T组于气管内滴注BLMA5生理盐水溶液（5 mg/kg）以复制急性肺损伤动物模型，并于造模当天每日给予齐留通100 mg/kg 灌胃；M组以生理盐水代替齐留通灌胃；C组则均用生理盐水代替BLMA5和齐留通。各组动物均于制模开始后的第7天处死，取左下肺置于4%多聚甲醛溶液中固定，制备石蜡包埋切片供病理学检测。 1.3 观测指标及方法 1.3.1 肺系数每只大鼠处死后，立即开胸取出肺组织，擦去表面的血迹称湿重，计算肺系数：肺系数＝肺湿重（g）／体重（g）×100 。 1.3.2 HE染色判断肺组织损伤程度将左下肺石蜡块切片进行HE染色，光镜下观察各组大鼠肺组织损伤程度。根据Szapiel等[1]提供的方法用HE染色评定肺组织肺泡炎程度（0～Ⅲ级）。 1.3.3 免疫组化肺组织TGF-β1水平检测采用链霉素亲和素－过氧化物酶（SABC）法，实验步骤按试剂盒说明书进行操作。应用CMIAS真彩色医学图像分析系统，每张切片在高倍视野（×400）下随机选取8个视野，测定每个视野中阳性细胞中阳性颗粒的平均光密度值（A值），A值越大表明阳性表达水平越高。 1.4 统计学处理 采用SPSS13.0统计软件进行分析，计量资料以x±s表示。等级资料转化为计量资料，方法如下：0级记0分，Ⅰ级记1分，Ⅱ级记2分，Ⅲ级记3分。两组间比较用t检验，α＝0.05为检验水准，P＜0.05为差异有显著性意义。 2 结果 2.1 肺系数变化 如表1所示，B组动物肺系数明显高于C组（P＜0.01）；T组动物在齐留通干预后肺系数较B组明显下降（P＜0.01），但仍高于C组（P＜0.01）。 2.2 肺组织病理学检查 肺大体观察，C组肺脏呈粉红色，表面光滑，有光泽度且质地软；M组肺体积增大，表面暗红，光泽度差，可见散在的灶性出血点；T组肺脏病变较M组有所减轻。 光镜下观察HE染色切片发现，C组肺组织结构完整，肺泡隔无水肿、炎症，肺泡腔清晰，仅见个别肺组织有轻微肺泡炎表现；M组可见肺泡间隔和肺泡腔内有大量炎性细胞浸润，肺组织弥漫水肿，肺泡隔增宽，部分肺泡内可见出血（P＜0.01）。T组肺组织水肿、炎性细胞浸润、出血等表现均较M组明显减轻（P＜0.05）(表1)。 2.3 免疫组化检测 镜下可见肺组织TGF-β1表达主要在肺泡上皮细胞、巨噬细胞、支气管黏膜上皮细胞、间质细胞等的胞浆中。M组肺组织内TGF-β1表达水平明显增强，与C组比较有显著性差异（P＜0.01）；T组TGF-β1